| 查看: 7960 | 回复: 26 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
在PCR仪中，从95度均匀降温到25度，怎么弄才能90s降温1度？
|
|||
|
最近，我要自己合成接头，接头的序列都知道，也从公司合成了单链，现在要把接头的两条单链通过退火来合成双链的。从网上看到碧云天的退火buffer，都说挺好使的，就买了。仔细阅读说明书后，才发现，里面有一个均匀退火的步骤，不好弄。是这样说的，每8s降温0.1度，如果PCR仪不具备这种功能的话，也可以90s降温1度。我从我们使用的PCR仪（ABI 2720）上，怎么弄都弄不好。从别的实验室找PCR仪，找到的能设置降温速度的，但是他们那里设置的*.*℃/s，看这格式，最慢的速度是0,1度每秒，而我要求的是0.01度每秒。又打算使用多不保温步骤来设置，90s降温1度，需要70步，但是PCR仪上最多六个HOLD 步骤。崩溃。。。。。。。 求助各位大仙们，有什么好的办法吗？ 注：我从网上看到把水烧开，放到室内，把要退火的体系放进去，让开水自然冷却，之后就能使用。这个方法很不错的。但是我们老师听到这个方法后就直接给我回绝了。想想，开水自然冷却，开始的时候降温快，随后降温速度慢，整体降温不均匀，可能会影响实验。但是 ，在退火过程中，降温的快慢又有什么影响呢？在普通PCR过程中，退火时的降温速率很快的，引物同样能结合到模板上，而均匀降温又是何解？大仙们，给个答案吧！please！ |
回复此楼» 猜你喜欢
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有287人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 中科院大连化学物理研究所人员招聘
已经有3人回复
- 2011年博士点基金联合资助课题立项公布
已经有3人回复
- 【交流】生物实验小技巧－抛玉引玉(欢迎大家分享自己的经验与技巧~~)
已经有48人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（一）
已经有20人回复
- 生物学软件介绍及其下载地址【学生物的会很有用】
已经有24人回复
- 【中国科学院部分项目介绍】绝无仅有，可以提供科研思路，很不错的
已经有858人回复
3楼2012-10-25 14:44:26
2楼2012-10-25 12:07:32