应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：蛋白变性后还能测浓度吗？
61/1返回列表
查看: 6524  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Daniela_2003

新虫 (小有名气)

[求助] 求助：蛋白变性后还能测浓度吗？

RT，测蛋白浓度时由于一些个人原因，没成功测出。现在蛋白已变性，还能用什么方法测浓度吗？有没有补救措施？之后要用这蛋白做WB。
谢谢~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
Come on ！^_^
1楼 2012-10-22 21:05:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有些方法是可以的。很多方法SDS对测定有干扰，不过BCA法可以的，你的标准曲线也做同样的变性处理。
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-23 08:32:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Daniela_2003

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-23 08:32:54
有些方法是可以的。很多方法SDS对测定有干扰，不过BCA法可以的，你的标准曲线也做同样的变性处理。

嗯，好的，谢谢你！我试着做看看，希望可以
赞一下 回复此楼
Come on ！^_^
3楼2012-10-23 12:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Daniela_2003

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-23 08:32:54
有些方法是可以的。很多方法SDS对测定有干扰，不过BCA法可以的，你的标准曲线也做同样的变性处理。

再补充一下，我是将5×loading buffer（配β-巯基乙醇）加入蛋白质中，然后100℃ 5min将其变性的，这样处理后对测浓度有影响吗？
赞一下 回复此楼
Come on ！^_^
4楼2012-10-23 13:04:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-24 15:11:50
引用回帖:
4楼: Originally posted by Daniela_2003 at 2012-10-23 13:04:28
再补充一下，我是将5×loading buffer（配β-巯基乙醇）加入蛋白质中，然后100℃ 5min将其变性的，这样处理后对测浓度有影响吗？...

还原剂对试剂的影响较大，巯基乙醇好像最多可以是0.01%。
实在不行的话可以用丙酮，甲醇，或者TCA沉淀少量样品，重新溶解后定量。
赞一下 回复此楼
5楼2012-10-24 06:16:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Daniela_2003

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-24 06:16:39
还原剂对试剂的影响较大，巯基乙醇好像最多可以是0.01%。
实在不行的话可以用丙酮，甲醇，或者TCA沉淀少量样品，重新溶解后定量。...

好的，谢谢~
回复此楼
Come on ！^_^
6楼2012-10-24 15:09:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Daniela_2003 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +5 26研0 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:21 by a不易
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:58 by 漾漾123sun
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习 +3 Losir 2026-03-12 3/150 2026-03-14 12:11 by 热情沙漠
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 一志愿华中农业大学071010，总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分，求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 求调剂（材料与化工327） +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 工科，求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 281求调剂 +9 Koxui 2026-03-12 11/550 2026-03-13 20:50 by Koxui
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生，2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭