应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：蛋白变性后还能测浓度吗？
61/1返回列表
查看: 6522  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Daniela_2003

新虫 (小有名气)

[求助] 求助：蛋白变性后还能测浓度吗？

RT，测蛋白浓度时由于一些个人原因，没成功测出。现在蛋白已变性，还能用什么方法测浓度吗？有没有补救措施？之后要用这蛋白做WB。
谢谢~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
Come on ！^_^
1楼 2012-10-22 21:05:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有些方法是可以的。很多方法SDS对测定有干扰，不过BCA法可以的，你的标准曲线也做同样的变性处理。
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-23 08:32:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Daniela_2003

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-23 08:32:54
有些方法是可以的。很多方法SDS对测定有干扰，不过BCA法可以的，你的标准曲线也做同样的变性处理。

嗯，好的，谢谢你！我试着做看看，希望可以
赞一下 回复此楼
Come on ！^_^
3楼2012-10-23 12:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Daniela_2003

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-23 08:32:54
有些方法是可以的。很多方法SDS对测定有干扰，不过BCA法可以的，你的标准曲线也做同样的变性处理。

再补充一下，我是将5×loading buffer（配β-巯基乙醇）加入蛋白质中，然后100℃ 5min将其变性的，这样处理后对测浓度有影响吗？
赞一下 回复此楼
Come on ！^_^
4楼2012-10-23 13:04:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-24 15:11:50
引用回帖:
4楼: Originally posted by Daniela_2003 at 2012-10-23 13:04:28
再补充一下，我是将5×loading buffer（配β-巯基乙醇）加入蛋白质中，然后100℃ 5min将其变性的，这样处理后对测浓度有影响吗？...

还原剂对试剂的影响较大，巯基乙醇好像最多可以是0.01%。
实在不行的话可以用丙酮，甲醇，或者TCA沉淀少量样品，重新溶解后定量。
赞一下 回复此楼
5楼2012-10-24 06:16:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Daniela_2003

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-24 06:16:39
还原剂对试剂的影响较大，巯基乙醇好像最多可以是0.01%。
实在不行的话可以用丙酮，甲醇，或者TCA沉淀少量样品，重新溶解后定量。...

好的，谢谢~
回复此楼
Come on ！^_^
6楼2012-10-24 15:09:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Daniela_2003 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +9 不知道叫什么！ 2026-03-15 10/500 2026-03-16 10:04 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-15 7/350 2026-03-16 09:43 by 闲人终南山
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 288求调剂 +14 王晓阳- 2026-03-09 19/950 2026-03-14 02:05 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学，英一数二305分求调剂，四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分，求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 快乐的香蕉 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 工科调剂 +4 Jiang191123！ 2026-03-11 4/200 2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 304求调剂（085602一志愿985） +12 化工人999 2026-03-09 12/600 2026-03-13 12:02 by JourneyLucky
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
[考博] 读博申请 +5 感dd 2026-03-10 7/350 2026-03-11 17:02 by QGZDSYS
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭