应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » G-250蛋白染色液的配制
191/2返回列表12下一页
查看: 2080  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

尚轩舞雪

银虫 (小有名气)

[求助] G-250蛋白染色液的配制

G-250蛋白染色液：考马斯亮蓝G-250 100mg溶于 50ml 95%乙醇，加入 100ml 85%磷酸，用蒸馏水稀释到1000ml。
请教下这里的85%磷酸是买的，还是用固体磷酸配制的呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-10-22 19:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
尚轩舞雪: 金币+3, ★★★★★最佳答案, 谢谢，学习了，我直接订购85％的磷酸。 2012-10-23 09:02:48
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-29 15:56:52
常见市售磷酸的浓度就是85%，拿那个配就可以了。如果不是特殊需要，一般实验室不会用到更纯的磷酸了。
赞一下 回复此楼
2楼2012-10-23 08:42:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

timmychina

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
尚轩舞雪: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2012-10-23 09:04:44
实验室有AR磷酸的话直接稀释，只有固体的话自己配也行。
赞一下 回复此楼
彩云之南的愿望还能实现吗
3楼2012-10-23 08:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尚轩舞雪

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by timmychina at 2012-10-23 08:44:04
实验室有AR磷酸的话直接稀释，只有固体的话自己配也行。

固体的话用质量分数w/v，还用灭菌或过滤处理吗？按市售85％磷酸来说也是浓酸了。
赞一下 回复此楼
4楼2012-10-23 09:06:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

timmychina

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 尚轩舞雪 at 2012-10-23 09:06:49
固体的话用质量分数w/v，还用灭菌或过滤处理吗？按市售85％磷酸来说也是浓酸了。...

我们用G250都是染PAGE胶的，没有必要进行灭菌处理。
赞一下 回复此楼
彩云之南的愿望还能实现吗
5楼2012-10-23 09:39:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尚轩舞雪

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by timmychina at 2012-10-23 09:39:09
我们用G250都是染PAGE胶的，没有必要进行灭菌处理。...

我也是用来做染色液的，作蛋白标准曲线，学习了，谢谢
赞一下 回复此楼
6楼2012-10-23 10:58:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

timmychina

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-29 15:57:08
不好意思 上一条回答错了  Commassie brilliant blue G250是用来定量蛋白的    Commassie brilliant blueR250是用于染胶的   配制时两者都不需要灭菌

1.10mg G-250
2.95%乙醇5ml
3.85%磷酸10ml
4.去离子水定容至100ml
5.4℃棕色瓶保存
赞一下 回复此楼
彩云之南的愿望还能实现吗
7楼2012-10-23 13:41:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尚轩舞雪

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by timmychina at 2012-10-23 13:41:57
不好意思 上一条回答错了  Commassie brilliant blue G250是用来定量蛋白的    Commassie brilliant blueR250是用于染胶的   配制时两者都不需要灭菌

1.10mg G-250
2.95%乙醇5ml
3.85%磷酸10ml
4.去离子水定 ...

我配的考马斯亮蓝在加入到检测蛋白中会出现悬浮的颗粒，是怎么回事啊，标准曲线一直做不好，请教下。
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-25 10:53:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

timmychina

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 尚轩舞雪 at 2012-10-25 10:53:06
我配的考马斯亮蓝在加入到检测蛋白中会出现悬浮的颗粒，是怎么回事啊，标准曲线一直做不好，请教下。...

充分溶解后如果还有颗粒的话，放置几个小时使其沉积，用的时候吸取容器上部的无悬浮液体。这个标准曲线没什么技术含量，相关系数差不多在0.990以上就可以。或者可以使用酶标仪或者BCA法定蛋白。
赞一下 回复此楼
彩云之南的愿望还能实现吗
9楼2012-10-25 15:58:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尚轩舞雪

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by timmychina at 2012-10-25 15:58:30
充分溶解后如果还有颗粒的话，放置几个小时使其沉积，用的时候吸取容器上部的无悬浮液体。这个标准曲线没什么技术含量，相关系数差不多在0.990以上就可以。或者可以使用酶标仪或者BCA法定蛋白。...

多谢啦，曲线做出来了，相关系数0.993
赞一下 回复此楼
10楼2012-10-28 20:11:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 尚轩舞雪 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西北工业大学289 085602 +31 yang婷 2026-04-10 31/1550 2026-04-11 00:19 by gong120082
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 一志愿京区985，085401电子信息，本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +22 土豆er? 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 10:58 by 高维春
[考研] 268分085602化学工程调剂 +24 月照花林。 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 08:09 by Sammy2
[考研] 070300化学 求调剂 +13 73372112 2026-04-08 13/650 2026-04-09 20:22 by maddjdld
[考研] 调剂 +19 2261744733 2026-04-08 19/950 2026-04-09 19:11 by vgtyfty
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 一志愿211，0703化学305分求调剂 +20 严西西戏 2026-04-06 26/1300 2026-04-08 22:12 by 凯凯要变帅
[考研] 293分求调剂，外语为俄语 +7 加一一九 2026-04-07 10/500 2026-04-08 20:14 by yutian743
[考研] 344求调剂 +11 魏子per 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:01 by JourneyLucky
[考研] 338求调剂 +5 小猪红色 678 2026-04-06 6/300 2026-04-07 21:18 by 乔哒哒哒
[考研] 一志愿南科大生物学297分，求调剂推荐 +8 Y-yyusx 2026-04-06 9/450 2026-04-07 19:38 by biomichael
[考研] 302分求调剂 一志愿安徽大学085601 +12 zyx上岸！ 2026-04-04 12/600 2026-04-07 02:09 by BruceLiu320
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +5 李rien 2026-04-05 5/250 2026-04-06 10:30 by zhyzzh
[考研] 277求调剂 +5 考研调剂lxh 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:03 by chy09050039
[考研] 调剂 +3 李广火 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:57 by 蓝云思雨
[考研] 材料化工306分找合适调剂 +14 沧海轻舟e 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:53 by 朱云虎202
[考研] 求调剂 +3 农业工程与信息� 2026-04-04 3/150 2026-04-04 12:19 by 舍而后得
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭