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wei_suzhen新虫 (小有名气)
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PCR扩增后,除了marker什么都没有,是什么原因呀?
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这是我引物的一些信息:上游引物的GC%含量是54.5%,Tm值是64.5°C,;下游引物GC%含量是66.7%,Tm值67.4°C。今天PCR通过设计退火温度梯度53.3℃、53.9℃、55.3℃、56.4℃、57.6℃、58.0℃,94℃预变性5min,94℃变性30s,72℃延伸2min,退货时间45s,30个循环。目的基因长度1257bp,配的0.8%的胶,190V电压(实验室都用这个电压),电泳后检测,除了maker什么都没有.不知道什么哪出问题啦?求大师指点。 [ Last edited by wei_suzhen on 2012-10-19 at 16:01 ] |
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2012-10-19 15:50:48, 40.43 K
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