应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌株复苏失败是怎么回事？
51/1返回列表
查看: 2043  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

[求助] 菌株复苏失败是怎么回事？

实验室一直以来做了很多T克隆，克隆正确的菌株以甘油冻存，一般是700ul菌液+300ul灭菌甘油，混匀后-80℃冻存。以前一直都没有问题的，最近这两三个月复苏菌株总会出现复苏不成功，或者要摇多几个小时才出现浑浊的情况，请问会在哪方面出问题了？甚至是国庆前保存的菌株，放完假回来复苏都不成功
有人说是不是感受态效率不高导致后面的摇菌都不成功，会是这样吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
你的日子如何，你的力量也必如何！
1楼 2012-10-19 13:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-22 07:24:24
sxxuan: 金币+2, ★有帮助 2012-10-22 16:36:38
引用回帖:
9楼: Originally posted by sxxuan at 2012-10-21 20:25:57
10%的甘油呢？会不会影响？...

我做菌种保藏甘油的浓度是15%。说是抑制，多数情况下也可以长，就是长得不好，不好用。所以总是先划下板再摇。多一个晚上在板上复苏一下也没什么大不了的吧。
赞一下 回复此楼
10楼2012-10-21 23:29:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

jinfangli

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sxxuan: 金币+3, ★有帮助 2012-10-20 14:42:01
菌种保存在10%甘油中。最多不要超过20%。复苏时要是结果不理想，先把菌液划板，再挑再摇
赞一下(1人) 回复此楼
fight
2楼2012-10-19 15:10:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sxxuan: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-10-20 14:40:46
反复冻化不好。把冻存的菌种从-80拿出来，不要化掉，用无菌牙签或者接种环刮几下划板。把菌迅速放回-80. 直接从冻存摇的细菌活力差，而且多余的甘油对细菌生长不利，经划板的菌株活力好，可以挑菌摇菌提质粒或者做表达用。
赞一下 回复此楼
3楼2012-10-20 12:03:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-20 12:03:43
反复冻化不好。把冻存的菌种从-80拿出来，不要化掉，用无菌牙签或者接种环刮几下划板。把菌迅速放回-80. 直接从冻存摇的细菌活力差，而且多余的甘油对细菌生长不利，经划板的菌株活力好，可以挑菌摇菌提质粒或者做表 ...

谢谢，如果是放在冰上操作如何？由于-80冰箱放在另一栋楼，来回拿都有点距离，谢谢
赞一下(1人) 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
4楼2012-10-20 14:40:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭