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sxxuan

金虫 (著名写手)

[求助] 菌株复苏失败是怎么回事?

实验室一直以来做了很多T克隆,克隆正确的菌株以甘油冻存,一般是700ul菌液+300ul灭菌甘油,混匀后-80℃冻存。以前一直都没有问题的,最近这两三个月复苏菌株总会出现复苏不成功,或者要摇多几个小时才出现浑浊的情况,请问会在哪方面出问题了?甚至是国庆前保存的菌株,放完假回来复苏都不成功
有人说是不是感受态效率不高导致后面的摇菌都不成功,会是这样吗?
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jinfangli

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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sxxuan: 金币+3, 有帮助 2012-10-20 14:42:01
菌种保存在10%甘油中。最多不要超过20%。复苏时要是结果不理想,先把菌液划板,再挑再摇
fight
2楼2012-10-19 15:10:12
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jinfangli

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
sxxuan: 金币+2, 有帮助 2012-10-22 16:37:06
引用回帖:
5楼: Originally posted by sxxuan at 2012-10-20 14:41:53
如果超过20%就不稳定了吗?我后来改用了10%的甘油都有出现这样的情况,是怎么回事了?而且是冻存都第一次拿出来用而已,才隔了一周的时间...

你保的菌种应该是活性比较好的阶段,保种时要注意无菌操作,我们这边还没出现这种情况,最好拿菌划板,重新挑菌
fight
6楼2012-10-20 14:54:20
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