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wanglei512

金虫 (正式写手)

[求助] 0.1%葡聚糖或0.1%木聚糖15% SDS-PAGE

看到有文章中,电泳后,将SDS-PAGE胶冲洗三遍:前两次在4°C 含25%异丙醇100mM醋酸钠缓冲液中冲洗30min,来去除SDS;然后用同样的缓冲液40°C孵育20—40min。室温下,用0.1%的刚果红溶液染色15min,然后用0.5%的乙酸冲洗,接着用1M NaCl冲洗,使得胶内酶活区域可以目测, 效果很好(如图),但是我跑了好多次都没有条带,是不是我的蛋白没表达,或者表达量很低需要浓缩,我想请教一下那种浓缩的办法最好,可以不影响酶活,还有就是样品与BUFFER混合后到底要不要煮沸

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