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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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nakamori0319

金虫 (小有名气)

[求助] 为什么有些蛋白质不适合采用疏水层析的原因

为什么有些蛋白质不适合采用疏水层析的原因,不是所有的蛋白质都有疏水性,根据疏水性的强弱就可以分离么
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nakamori0319: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-10-18 16:04:29
不是所有的蛋白都适合采用疏水层析的,尽管疏水作用力不一样。举个简单的例子,比如你的蛋白含有辅酶或辅基,辅基与柱材料的疏水作用力与你蛋白不一样,洗脱的时候导致辅基与多肽的分离,这样蛋白就失去原有活性。多亚基蛋白也有可能导致各亚基的分离。实验顺利。
2楼2012-10-18 14:29:09
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nakamori0319

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ynkuaile at 2012-10-18 14:29:09
不是所有的蛋白都适合采用疏水层析的,尽管疏水作用力不一样。举个简单的例子,比如你的蛋白含有辅酶或辅基,辅基与柱材料的疏水作用力与你蛋白不一样,洗脱的时候导致辅基与多肽的分离,这样蛋白就失去原有活性。多 ...

追问一句,是不是经过疏水层析,蛋白的构象会发生变化,这样的话,作为疫苗的蛋白质也不可以通过疏水层析作用吧
3楼2012-10-18 16:05:33
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by nakamori0319 at 2012-10-18 16:05:33
追问一句,是不是经过疏水层析,蛋白的构象会发生变化,这样的话,作为疫苗的蛋白质也不可以通过疏水层析作用吧...

一般的蛋白质亲水氨基酸在外侧,疏水氨基酸包埋在分子内部。在疏水作用层析时,高浓度的盐由表面张力,可以破坏蛋白质与水的作用,使内部的一些疏水氨基酸暴露出来,从而和柱材料相结合,低浓度的盐洗脱时,疏水侧链又重新包埋进分子内部,从而洗脱下来。这个构象的变化是很微小的,可以认为没有变化,因为蛋白质分子很多部分是柔性的,不是刚性的。不放心的话,可以纯化完测测效价。实验顺利。
4楼2012-10-18 20:13:47
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nakamori0319

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ynkuaile at 2012-10-18 20:13:47
一般的蛋白质亲水氨基酸在外侧,疏水氨基酸包埋在分子内部。在疏水作用层析时,高浓度的盐由表面张力,可以破坏蛋白质与水的作用,使内部的一些疏水氨基酸暴露出来,从而和柱材料相结合,低浓度的盐洗脱时,疏水侧 ...

好的,十分感谢!
5楼2012-10-19 10:56:52
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malong198809

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ynkuaile at 2012-10-18 20:13:47
一般的蛋白质亲水氨基酸在外侧,疏水氨基酸包埋在分子内部。在疏水作用层析时,高浓度的盐由表面张力,可以破坏蛋白质与水的作用,使内部的一些疏水氨基酸暴露出来,从而和柱材料相结合,低浓度的盐洗脱时,疏水侧 ...

一般蛋白质的疏水氨基酸在外侧吧,因为蛋白质的溶解性一般不怎么样啊,有看到书上写疏水氨基酸躲在外侧,
虚拟现实技术
6楼2014-05-01 13:11:58
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