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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 为什么有些蛋白质不适合采用疏水层析的原因
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nakamori0319

金虫 (小有名气)

[求助] 为什么有些蛋白质不适合采用疏水层析的原因

为什么有些蛋白质不适合采用疏水层析的原因，不是所有的蛋白质都有疏水性，根据疏水性的强弱就可以分离么
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1楼 2012-10-17 22:31:02
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
nakamori0319: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-10-18 16:04:29
不是所有的蛋白都适合采用疏水层析的，尽管疏水作用力不一样。举个简单的例子，比如你的蛋白含有辅酶或辅基，辅基与柱材料的疏水作用力与你蛋白不一样，洗脱的时候导致辅基与多肽的分离，这样蛋白就失去原有活性。多亚基蛋白也有可能导致各亚基的分离。实验顺利。
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2楼2012-10-18 14:29:09
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nakamori0319

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ynkuaile at 2012-10-18 14:29:09
不是所有的蛋白都适合采用疏水层析的，尽管疏水作用力不一样。举个简单的例子，比如你的蛋白含有辅酶或辅基，辅基与柱材料的疏水作用力与你蛋白不一样，洗脱的时候导致辅基与多肽的分离，这样蛋白就失去原有活性。多 ...

追问一句，是不是经过疏水层析，蛋白的构象会发生变化，这样的话，作为疫苗的蛋白质也不可以通过疏水层析作用吧
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3楼2012-10-18 16:05:33
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ynkuaile

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by nakamori0319 at 2012-10-18 16:05:33
追问一句，是不是经过疏水层析，蛋白的构象会发生变化，这样的话，作为疫苗的蛋白质也不可以通过疏水层析作用吧...

一般的蛋白质亲水氨基酸在外侧，疏水氨基酸包埋在分子内部。在疏水作用层析时，高浓度的盐由表面张力，可以破坏蛋白质与水的作用，使内部的一些疏水氨基酸暴露出来，从而和柱材料相结合，低浓度的盐洗脱时，疏水侧链又重新包埋进分子内部，从而洗脱下来。这个构象的变化是很微小的，可以认为没有变化，因为蛋白质分子很多部分是柔性的，不是刚性的。不放心的话，可以纯化完测测效价。实验顺利。
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4楼2012-10-18 20:13:47
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nakamori0319

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ynkuaile at 2012-10-18 20:13:47
一般的蛋白质亲水氨基酸在外侧，疏水氨基酸包埋在分子内部。在疏水作用层析时，高浓度的盐由表面张力，可以破坏蛋白质与水的作用，使内部的一些疏水氨基酸暴露出来，从而和柱材料相结合，低浓度的盐洗脱时，疏水侧 ...

好的，十分感谢!
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5楼2012-10-19 10:56:52
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malong198809

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ynkuaile at 2012-10-18 20:13:47
一般的蛋白质亲水氨基酸在外侧，疏水氨基酸包埋在分子内部。在疏水作用层析时，高浓度的盐由表面张力，可以破坏蛋白质与水的作用，使内部的一些疏水氨基酸暴露出来，从而和柱材料相结合，低浓度的盐洗脱时，疏水侧 ...

一般蛋白质的疏水氨基酸在外侧吧，因为蛋白质的溶解性一般不怎么样啊，有看到书上写疏水氨基酸躲在外侧，
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虚拟现实技术
6楼2014-05-01 13:11:58
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