| 查看: 3349 | 回复: 16 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
请大家帮我看看我的southern blot 图片，不知道问题出在哪里了，谢谢已有1人参与
|
||
|
southern blot 实验目的是为了验证突变体基因被敲除（1,2分别是两个不同突变体） 1.使用单酶切5小时左右； 2.基因组DNA浓度约为450ng/uL，上样量每孔50微升，跑胶（0.8%）5小时左右，条带很亮； 3.试剂盒是Roche Kit I, 洗脱条件为：68℃ 2×SSC，0.1%SDS 洗30min, 68℃ 0.5×SSC，0.1%SDS 洗15min，洗两次； 4.探针是PCR目的基因部分片段的回收产物，大小约为400和700bp。 问题： 探针第一和第二次用的相同，第一次Marker（TAKARA DL15000）未杂出条带，目的基因野生型与突变体有目的条带； 第二次-1基因做出来了，-2效果不太好； 第三次-1是新做的探针，有杂带，背景信号也很高，-2仍是之前的探针，却没有杂出目标条带。 麻烦大家帮我分析分析是什么原因，有什么好的解决方法。不甚感激~~~~  第一次-1.jpg  第一次-2.jpg  第二次-1.jpg  第二次-2.jpg  第三次-1.jpg  第三次-2.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有52人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
15楼2014-05-16 09:50:52
2楼2012-10-16 22:54:15
3楼2012-10-17 21:53:21
5楼2012-10-20 11:54:04