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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

[求助] 质粒转染细胞的问题!!!

请问质粒转染细胞时要线性化吗?线性化有什么作用?我转CHO-K1。质粒是带有GS基因的筛选质粒。
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Only the strong survive.
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止水之殇

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
暖暖暖: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-10-18 14:59:54
因为质粒是随机整合进宿主基因组的,整合时质粒首先要切断,这也是随机切断的,所以你先线性化的话,可以避免随机性,保证你的目的基因和筛选基因不会受到影响,但是线性化并不会提高转染效率。
年轻的心本不该静如止水,波澜不惊!
2楼2012-10-14 13:08:44
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

转染质粒细胞是不需要线性化的,用过DeofectEU Transfection Reagent转染质粒细胞,DeofectEU 在完全培养基中(基础培养基中添加血清)具有最高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清培养基。细胞毒性比较低,成功率比较高。
3楼2019-03-06 11:18:02
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

我们以前做过,但是我们用电击法转染 你们线性化质粒就是将质粒单酶切然后割胶回收就可以转了吗?我想问现在用RFect-DNA瞬时转染也需要线性化吗
4楼2019-05-17 13:04:09
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