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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 质粒转染细胞的问题！！！
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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

[求助] 质粒转染细胞的问题！！！

请问质粒转染细胞时要线性化吗？线性化有什么作用？我转CHO-K1。质粒是带有GS基因的筛选质粒。
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Only the strong survive.
1楼2012-10-10 19:45:06
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止水之殇

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
暖暖暖: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-10-18 14:59:54
因为质粒是随机整合进宿主基因组的，整合时质粒首先要切断，这也是随机切断的，所以你先线性化的话，可以避免随机性，保证你的目的基因和筛选基因不会受到影响，但是线性化并不会提高转染效率。
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年轻的心本不该静如止水，波澜不惊！
2楼2012-10-14 13:08:44
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)
转染质粒细胞是不需要线性化的，用过DeofectEU Transfection Reagent转染质粒细胞，DeofectEU 在完全培养基中(基础培养基中添加血清)具有最高的转染效率，因此转染前后不需要换成无血清培养基。细胞毒性比较低，成功率比较高。
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3楼2019-03-06 11:18:02
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)
我们以前做过，但是我们用电击法转染 你们线性化质粒就是将质粒单酶切然后割胶回收就可以转了吗？我想问现在用RFect-DNA瞬时转染也需要线性化吗
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4楼2019-05-17 13:04:09
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