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1256744926

铁虫 (初入文坛)

[求助] HPLC问题请教

做HPLC 时，流动相如下A0.05%三氟乙酸，B乙腈
       0-40min：A：95%-60%
           40-60min：A: 60%-40%
           60-61min:A: 40%-95% 维持4min
前面都走得好好的，从某一针开始，走到50min的时候，出现一个大峰，然后基线就开始往上漂的厉害，一直到走完。进了很多针，都这样，重新配流动相试过，换柱子试过，都是这种情况。请问是什么原因，以及解决的方法？本人是第一次做HPLC,还请大家帮助，非常非常感谢！
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1楼 2012-09-28 21:54:55
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lidong188

铜虫 (小有名气)
液相的色谱条件可以考虑调整一下，上两种流动相混合比例为50%时，黏度最大，可能造成泵的压力增大，在60%-40%较长时间的梯度洗脱可能造成基线上扬。可以试着减少60-40%梯度洗脱时间看看
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9楼2012-12-13 14:28:32
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wm彼岸花

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-29 12:43:11
残留？不过梯度洗脱基线是没有等度稳，建议看下有没有残留吧
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2楼2012-09-28 22:11:32
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mxx7456

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-29 12:43:18
是大峰还是大包呢，进行样品过滤或者尝试别的样品做对比，是否还会出现同样的情况
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3楼2012-09-29 08:29:22
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1256744926

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mxx7456 at 2012-09-29 08:29:22
是大峰还是大包呢，进行样品过滤或者尝试别的样品做对比，是否还会出现同样的情况

是大峰，进过不同的样品，标准品，都是一样的情况啊，郁闷啊，不知道怎么回事！
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4楼2012-09-29 11:12:22
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