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[求助]
逆转录-pcr图，就解
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最近在做反转录-PCR,结果是很奇怪啊，因此上传图片求高人指导： 首先我的RNA是从细胞里提出来的。 现在是做了反转录，并做了PCR ，跑胶结果让我很郁闷。 反转录的体系是： DEPC水：1微升 total RAN ：10微升（在小皿里种的细胞，浓度低，总量为0.98微克） oligodT:1微升（1微克） dNTPs：2微升 PCR仪，70度，10分钟，后冰浴10MINS. 然后离心，后加入5*AMV酶buffer ：4微 RNasin：1微 AMV:1微 混匀，PCR 仪，42度，60mins；95度，10mins。 然后做PCR. 体系： 2*PCR mix 10微 上游引物：1微（10微摩/升） 下游引物：1微（10微摩/升） cDNA:1微 超纯水补足到20微。 T=95度，3mins T=94度，1min T=58度，1min T=72度，4mins, 35个cycle。 结果如图： |
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2012-09-26 19:16:45, 1.53 M
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cicelyzh
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