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connieba

新虫 (小有名气)

[求助] 全式金的pEASY-EI载体和目的基因连不上

做了很多次了,大小2.7kb的目的基因一直连不上pEASY-E1载体。感受态和载体确定都没有问题,步骤也完全按照说明书上的做的。转化Trans-T1感受态后涂Amp平板,能长出单菌落,但是挑取单菌落做菌落PCR都呈阴性。实在是找不到原因了,望好心人帮助~是实验手法的问题吗?之前也做过连接1.8Kb目的基因的,很顺利的就连上了~
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summergca

铜虫 (初入文坛)

载体本身就有问题,我们用他们载体连接做过测序,存在污染,换载体吧
8楼2012-11-30 17:23:46
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