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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 薄层色谱，如何怎样提高分离度
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piaoran168

金虫 (正式写手)

[求助] 薄层色谱，如何怎样提高分离度

最近一直在做实验，也就是做一个氨基酸产品中的有关物质，是强极性的物质，用薄层色谱（TLC），药典上类似的物质大都用这个方法，所以现在这个产品也打算用这个方法的，但是做了很多次，用正丙醇：浓氨水=2:1做展开剂的，在系统适用性实验时候，是分开了，但是两个点的距离很近，约5毫米，Rf值分别为0.13和0.08，分离度约1.3，现在想让它们距离再分开点，怎么办啊？
   看了药典的指导原则，Rf一般在0.2-0.8范围，分离度大于2，在调整展开剂问题上，有三点困惑的：
（1）目前我做的产品，用HPLC已经显示有一个已知杂质，但是含量很低，而想尝试着用TLC检测最好能检测出来节省成本，但是在这个展开剂的体系下，样品只显示一个点，未显示其他的杂质存在，是不是说明这个体系可以用，但是由于板的灵敏度不够，所以才检测不出来啊？这个体系还有必要再尝试下去吗？
（2）是不是有系统适用性试验有分开的迹象，就在这个展开剂的体系调整比例就好了啊，不用再换其他的展开剂吗?
（3）如果换其他的展开剂，该如何调整呢？是增大极性还是降低极性？
  以前对于薄层只是很浅薄的了解，没有想到学问还那么多，有经验的虫友帮忙来指点一下啊！目前自己做的情况有点盲目，但是还是硬头皮做下去，领导天天在那要效率效率，压力好大，做梦都在配展开剂，郁闷！今天两个手也茚三酮污染了，洗不掉只能等待吸收了，还打算明年要孩子呢，怎么办，越做越郁闷，越做越害怕伤身体！

[ 来自科研家族 快乐家族 ]
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1楼2012-09-18 16:47:32
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残暴的肉球

(文坛精英)

小弟一枚

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★ ★ ★
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piaoran168: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-19 20:49:10
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-09-20 09:08:10
办法不是没有，你可以试试看爬二维板。方法倒是简单，不过一般是用不到的
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5楼2012-09-19 16:22:19
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残暴的肉球

(文坛精英)

小弟一枚

【答案】应助回帖

★ ★ ★
piaoran168: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-20 08:52:40
leecius: 金币+1, 谢谢参与。 2012-09-20 09:08:18
引用回帖:
6楼: Originally posted by piaoran168 at 2012-09-19 20:52:03
弱弱的问一句，什么是二维板，如何实现啊？谢谢...

一般是正方形的玻璃板，上面铺上硅胶。然后一边爬完之后，在邻边再爬。也就是说一个点在两个方向爬两次，这两个方向是互成90°。你看看你的板子能这么爬么？
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7楼2012-09-19 20:55:17
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残暴的肉球

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小弟一枚
★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-20 11:36:13
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8楼: Originally posted by piaoran168 at 2012-09-20 08:53:50
今天我试试啊，我用的板刚好是正方形的板，谢谢你啊！...

你最好先看看你原先的能不能这样爬，这只是一种方法，条件较为苛刻，所以不常用。不过要是能用的话效果很不错
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9楼2012-09-20 09:22:51
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残暴的肉球

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小弟一枚
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11楼: Originally posted by piaoran168 at 2012-09-20 13:52:05
呵呵，经试验好像不行，一下点七个样，原来跑完，烘干后再90度跑板，好像把点都重叠在一块了。应该出现七个点的，结果只出现四个很浓的点，而且还有一个不在队伍中的点也出来，推测是不是垂直跑的时候，把点带跑到 ...

7个 ，这个方法我没见人用于超过4个点的。我错了
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12楼2012-09-20 13:59:09
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残暴的肉球

(文坛精英)

小弟一枚
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18楼: Originally posted by piaoran168 at 2012-09-22 20:32:16
这两天没有上网，有这么多的朋友帮我来出主意，谢谢啊！是吗，呵呵，我是无知者无畏！...

我倒是没有见过有谁明确这么说的，理论上多少个点都可以爬的。但是最后就太花掉了
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19楼2012-09-22 20:34:31
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残暴的肉球

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小弟一枚
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21楼: Originally posted by piaoran168 at 2012-09-22 20:47:32
你说的很对，我感觉情况就是花了的结果，有一个莫名其妙的出在一个位置上，有点晕，好像是拧在一块了！还是在试试吧，...

算了，我试过2个点的，分的虽然看了，但是都有点花了。7个点的可能性太小了。其实还有一个方法你可以试试看，要是物质的Rf都挺小的话可以故意怕过头。

楼主看看你那个有可能么
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22楼2012-09-22 20:50:42
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