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piaoyunokok

木虫 (正式写手)

[交流] PCR电泳图 已有9人参与

大家帮忙分析分析这是神马状况啊？第2-7是一个基因的，9-13是另外一个的，可是条带位置明显不对啊。。。。

无标题.png
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1楼 2012-09-14 22:23:31
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by btx362237729 at 2012-09-17 19:21:24
2-7都弥散了，退火温度没摸好吧，做个TD PCR

那一般是退火温度太高了还是过低了呢？
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9楼2012-09-18 00:07:33
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普通回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)
怎么就没人回呢？
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2楼2012-09-15 15:38:34
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lidonghong

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这是降解了吧！怎么跑的这么弥散
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生物化学与分子生物学
3楼2012-09-15 16:38:09
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jl860822

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的胶怎么四角发光呢？这个没遇到过，你的Marker还可以，说明胶应该没啥问题，你拍胶的时候垫一块板或者一次性手套，你的PCR应该是失败的，没看出明显条带，不知道你的目的条带多大
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4楼2012-09-17 08:40:11
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-17 13:55:09
1:从MARKER来看，你的胶是没有问题的.
2.跑出来的条带如此弥散，可以考虑PCR试剂出现了污染，模板，酶，水，buff都换一下看看
3.另外每次PCR做一管水的对照，可以排除模板的问题.
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
5楼2012-09-17 08:46:14
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kkzzll0624

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-17 13:55:20
2-7PCR是失败的，有两种可能，一是模板质量太差，二是引物组合有问题
9-13有扩增，但是引物二聚体太严重了，建议优化一下引物，或者反应体系。
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好好学习，天天向上！
6楼2012-09-17 09:49:15
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sd3824289

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主把你的PCR体系说一下啊！我们好分析啊！
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坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
7楼2012-09-17 15:40:16
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btx362237729

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
2-7都弥散了，退火温度没摸好吧，做个TD PCR
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人生最黑暗的时光终于过去了
8楼2012-09-17 19:21:24
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piaoyunokok

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by kkzzll0624 at 2012-09-17 09:49:15
2-7PCR是失败的，有两种可能，一是模板质量太差，二是引物组合有问题
9-13有扩增，但是引物二聚体太严重了，建议优化一下引物，或者反应体系。

这个对于优化引物有点困难，反应体系只改主要针对哪些因素呢？
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10楼2012-09-18 00:08:40
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