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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱分不开~~~~~~~~求助啊~~~~~~~~~~
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vera0610

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱分不开~~~~~~~~求助啊~~~~~~~~~~

我的物质是多个磺酸钠取代的间苯二酚，有二取代和三取代
我自己建立的分析方法是：流动相为水（Na2SO4=0.1mol/L）：甲醇：乙腈=86：10：4
流速0.5ml/min 柱温30℃ 样品浓度10mg/l 检测波长210nm
谱图见附件

调节流动相的配比以及调节pH都试过了，就是分不开，求助啊！！！！
我用的柱子是Agilent Zorbax SB-C18 4.6*250mm 5um
会不会是我柱子选得不好，用什么柱子更好呢？

未命名.jpg
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1楼 2012-09-12 14:05:00
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vknight

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助 2012-09-13 17:49:05
柱温高一点，样品浓度低一点，流动相一开始从95%的水相开始走梯度洗脱，水里边加点缓冲盐试试，最后实在不行就换柱子吧
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会做饭的男人才是最帅的！！！
3楼2012-09-12 15:44:14
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mikey_m

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助 2012-09-13 17:48:55
你用的是反相柱，分离的化合物却是极性很强的
所以保留是较弱的，优化建议如下：
1 流动相 等度的分离比梯度差，可从100%水相起，逐步过渡到中等有机相；
2 流动相优化不理想的情况下，可以考虑处理底物，如将极性基团进行处理，减弱化合物的极性后进行分析；另外就是换用其它色谱柱了，可选择用于极性化合物分离的色谱柱
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2楼2012-09-12 14:57:03
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guevara1967

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 辛苦了~ 2012-09-13 17:49:35
换磷酸盐，调一下pH，单独用甲醇或乙腈试试
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梦想、激情、灵感、体验--che
4楼2012-09-13 10:09:49
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vera0610

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mikey_m at 2012-09-12 14:57:03
你用的是反相柱，分离的化合物却是极性很强的
所以保留是较弱的，优化建议如下：
1 流动相 等度的分离比梯度差，可从100%水相起，逐步过渡到中等有机相；
2 流动相优化不理想的情况下，可以考虑处理底物，如将极 ...

1.请问梯度从100%水相开始会对柱子有损伤吗？会造成柱子塌陷什么的吗？
2.磺酸基可以如何处理来降低极性呢？我有机不太好。。。
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5楼2012-09-13 12:47:46
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