应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何蛋白原核表达，并去掉第一个氨基酸met
51/1返回列表
查看: 2833  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

fool135

银虫 (小有名气)

[求助] 如何蛋白原核表达，并去掉第一个氨基酸met

原核表达时，翻译是从多克隆位点处第一个酶切位点开始翻译么?
基因N末端的酶切位点也被翻译吧，能表达整个蛋白不加入额外的氨基酸么？
不想要第一个氨基酸met是不是构建时去掉ATG序列就行？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
罗罗
1楼 2012-09-12 09:07:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fool135

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by junminh at 2012-09-13 13:37:05
不是，直接加入就可以了，具体找遍文献，可以分析下别人加的。如：你只需要加入小肽及你目的蛋的，可构建：限制酶切位点+小肽标签+目的基因
，如果你想在蛋白里剪掉不要的多肽，或者你的小肽，才在小肽与目的蛋白间 ...

我又仔细看了载体图谱，明白了。非常感谢你的解答。
赞一下 回复此楼
罗罗
7楼2012-09-13 15:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fool135: 金币+10, ★★★很有帮助, 解答很好 2012-09-30 09:27:18
1）从第一个ATG开始翻译；2）酶切位点在启动子序列后面，当然被翻译，若在外面则不翻译，若翻译，可加入蛋白酶切去除；3）第一个ATG启动，不翻译MET，SO---------
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

fool135
2楼2012-09-12 10:41:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fool135

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by junminh at 2012-09-12 10:41:58
1）从第一个ATG开始翻译；2）酶切位点在启动子序列后面，当然被翻译，若在外面则不翻译，若翻译，可加入蛋白酶切去除；3）第一个ATG启动，不翻译MET，SO---------

我想在N末端加一个短肽标签，不引入其他氨基酸。是不是通常的方法行不通？
酶切和内涵肽的方法我查过，但没具体做过，酶切的酶贵么，通常用哪里的酶，好操作不?
这个ATG一般在多克隆位点的前边吧，因为不加ATG蛋白通常也能表达。
赞一下 回复此楼
罗罗
3楼2012-09-12 11:56:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junminh

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-12 16:07:00
直接加就行了，加了标签就是额外增加了，不需要其它的，不加就是了。2）查文献，生物论坛中有很多这样的交流。3）不加是能表达，但是前面肯定有启动子，从哪启动从哪开始表达。
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-12 13:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭