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zhoulir7

新虫 (初入文坛)

[求助] 亲水性物质柱分离

大家好!我最近从发酵液中分离一种具有抗褐变活性的物质,目前得到的信息是:1.有效成分的分子量在1000以下,2.热稳定性很好,3.蛋白酶稳定性也很好,4.样品在浓缩后或冻干后很黏,糖含量比较高。5.过AB-8大孔树脂柱后100ml接一管,第2,3管的活性最高,20%乙醇和40%乙醇洗脱的部分几乎无活性。6.将水洗的2,3管浓缩后上sephadexG-15凝胶柱后,有三个峰,第一个峰有较高的活性7.有活性的成分在264nm处有强吸收。8.将有活性的部分进行HPLC检测,以甲醇水为流动相,在5分钟左右出峰,大概有三个小峰,一个很大的峰,基本能分开,且流动相中水的含量为95%。
请问:1.怎么来判断该活性物质是哪一类
2.可不可以做一下液质来分析一下,但液相的条件如何优化
3.我的实验思路可不可行,有什么好的建议

只有半年时间了,现在着急啊,老板就一句话把有效成分分出来,也不给什么指导,还天天催着发英文文章,愁啊!
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vvsober

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhoulir7 at 2012-09-18 15:13:03
谢谢,是打算做一下液质,最近做了液相,用了1%醋酸纯水做流动相分离效果比较好,在5分钟左右有个强峰,边上有4、5个小峰,分的比较开,但是不知道质谱条件用什么好?...

液质的条件和液相的流动相条件是一样的啊,不过用的柱子不一样,流速不一样。。
选择出色
4楼2012-09-18 16:35:32
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做做Hplc-ms/ms。然后分析二级质谱,与文献比对,多数可以确定母核结构。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
天道酬勤!
2楼2012-09-12 13:01:07
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zhoulir7

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by netscaner at 2012-09-12 13:01:07
做做Hplc-ms/ms。然后分析二级质谱,与文献比对,多数可以确定母核结构。

谢谢,是打算做一下液质,最近做了液相,用了1%醋酸纯水做流动相分离效果比较好,在5分钟左右有个强峰,边上有4、5个小峰,分的比较开,但是不知道质谱条件用什么好?
3楼2012-09-18 15:13:03
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