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well_想太多

新虫 (小有名气)

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20楼: Originally posted by 麦子绿豆 at 2014-03-01 12:55:39
85% 浓磷酸 这种方法比用乙醇好一些...

楼主,我现在配出来的1%胶体几丁质放置一会后就分层了,这是正常的吗?还想请问一下您说的烘干称重,我可不可以先抽滤然后在烘干呢?
21楼2014-03-02 18:32:14
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well_想太多

新虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by 麦子绿豆 at 2014-03-01 12:55:39
85% 浓磷酸 这种方法比用乙醇好一些...

楼主,我看文献里没有提及浓磷酸的具体用量,及最后加蒸馏水的量,请问和浓盐酸时一样的吗?还有请问您开始时用丙酮研磨了吗?我做出来的就是还是颗粒明显,静置时会分层,倒平板也不是均匀分散在水中,焦虑死了,万分感谢您的帮助!
22楼2014-03-03 22:22:21
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麦子绿豆

银虫 (小有名气)

内容已删除
23楼2014-03-07 14:19:46
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well_想太多

新虫 (小有名气)

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11楼: Originally posted by e101 at 2012-10-31 15:49:28
请问楼主做的是放线菌么?最后你是怎样处理的?镜检是否有待测菌株?45度水浴过夜是否时间太长?
我做的是放线菌,但对照和待测液OD540值几乎一样大小,请问为什么?
大体步骤:
1.打孔菌株摇床发酵(培养液:几 ...

我也是做放线菌的,不知道你这个方法最后成功没有,45度水浴是不是太高了,我看大家用的37度比较多.而且发酵液离心是不是要用4度离心机?
24楼2014-04-20 21:01:25
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xxnly

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的培养基碳源是什么?有没有结块的?酶有可能吸附到发酵液除去上清液的部分。测一下发酵液的沉淀部分是否有酶活。
啊!我要毕业了……天!赐我一份工作吧!
25楼2014-04-24 11:07:41
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well_想太多

新虫 (小有名气)

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25楼: Originally posted by xxnly at 2014-04-24 11:07:41
你的培养基碳源是什么?有没有结块的?酶有可能吸附到发酵液除去上清液的部分。测一下发酵液的沉淀部分是否有酶活。

我做的是放线菌的几丁质酶活,其中种子液中菌体结球了,这是菌种的原因还是培养基液体的原因呢?得不到浑浊均一的液体,转发酵时的接种量也不是很准确,
26楼2014-04-28 15:30:37
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麦子绿豆

银虫 (小有名气)

引用回帖:
26楼: Originally posted by well_想太多 at 2014-04-28 15:30:37
我做的是放线菌的几丁质酶活,其中种子液中菌体结球了,这是菌种的原因还是培养基液体的原因呢?得不到浑浊均一的液体,转发酵时的接种量也不是很准确,...

是不是污染了?
27楼2014-04-28 21:59:13
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xxnly

金虫 (小有名气)

引用回帖:
26楼: Originally posted by well_想太多 at 2014-04-28 15:30:37
我做的是放线菌的几丁质酶活,其中种子液中菌体结球了,这是菌种的原因还是培养基液体的原因呢?得不到浑浊均一的液体,转发酵时的接种量也不是很准确,...

亲,可以加入表面活性剂试试,如吐温、司班、OP等,做个浓度梯度,应该就不会结球啦!
啊!我要毕业了……天!赐我一份工作吧!
28楼2014-04-29 15:46:23
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well_想太多

新虫 (小有名气)

引用回帖:
27楼: Originally posted by 麦子绿豆 at 2014-04-28 21:59:13
是不是污染了?...

应该不是,就是菌体成球状了,怀疑和液体粘度有关,因为是放线菌,可能有菌丝粘连现象吧.想加入玻璃珠打碎试试
29楼2014-04-29 15:53:12
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well_想太多

新虫 (小有名气)

引用回帖:
28楼: Originally posted by xxnly at 2014-04-29 15:46:23
亲,可以加入表面活性剂试试,如吐温、司班、OP等,做个浓度梯度,应该就不会结球啦!...

但是加入活性剂对菌体的生长会不会有影响呢?我目前是想改变一下种子培养基中酵母膏的浓度,试着增加一下液体的粘度
30楼2014-04-29 18:00:36
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