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fxianlei

木虫 (职业作家)

[求助] 高效液相色谱求助

两个样品溶于甲醇之后,用甲醇:水=50:50的流动相分别做了液相,样品看起来都挺纯的,不过都是在14分钟左右的样子出峰,担心混在一起之后分不开。果然混在一起进了一针液相图谱上分不开,还是在14-15分钟出了一个大峰,在混合体系中我该怎么调流动相把这两者分开,结构如图所示,我是个菜鸟,刚刚接触高效液相色谱,很多都不懂,还希望高人多多指教。

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michaelye1800

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fxianlei: 金币+3 2012-09-12 06:22:24
这两个物质的疏水性差不多,用甲醇和水做流动相很难分开,可在流动相中添加少量的酸或碱,通过pH的差异来分离,加0.05%的三氟乙酸或0.05%的三乙胺;加酸可能更好些,一般柱子都不耐碱
9楼2012-09-11 20:03:03
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fxianlei: 金币+2 2012-09-10 16:10:51
可以试着用buffer,调节一下pH,氨基可以质子化,酚羟基也可以解离的。
个人觉得高一点的pH有助于分离。
七窍通了六窍
3楼2012-09-10 15:39:44
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普通回帖

deepwaterh

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fxianlei: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-10 16:10:58
用梯度洗脱试试,可以先试一下0~100,然后再根据情况调节合适的梯度。
2楼2012-09-10 14:30:42
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fxianlei

木虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by deepwaterh at 2012-09-10 14:30:42
用梯度洗脱试试,可以先试一下0~100,然后再根据情况调节合适的梯度。

直接选流动相,有没有什么好的方法,我是刚刚接触液相,很多的名词都不懂,就知道选流动相的比例
4楼2012-09-10 16:16:33
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fxianlei

木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by platto at 2012-09-10 15:39:44
可以试着用buffer,调节一下pH,氨基可以质子化,酚羟基也可以解离的。
个人觉得高一点的pH有助于分离。

直接选流动相,有没有什么好的方法,我是刚刚接触液相,很多的名词都不懂,就知道选流动相的比例
5楼2012-09-10 16:16:40
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fxianlei: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-11 12:34:16
水中加点三乙胺调整下PH,就分开了
6楼2012-09-11 10:37:13
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fxianlei

木虫 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by liu2011 at 2012-09-11 10:37:13
水中加点三乙胺调整下PH,就分开了

用加了三乙胺的水做流动相?
7楼2012-09-11 12:34:36
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
fxianlei: 金币+2 2012-09-11 13:12:15
fxianlei: 金币+2 2012-09-12 06:22:18
引用回帖:
7楼: Originally posted by fxianlei at 2012-09-11 12:34:36
用加了三乙胺的水做流动相?...

是的,能分开,我觉得能分开,你最好试一下
8楼2012-09-11 13:04:39
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QAZ15000

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fxianlei: 金币+3 2012-09-12 06:22:33
同意加缓冲液,ph 5-6估计有戏
努力再努力
10楼2012-09-11 20:13:38
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