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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相色谱求助
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fxianlei

木虫 (职业作家)

[求助] 高效液相色谱求助

两个样品溶于甲醇之后，用甲醇：水=50:50的流动相分别做了液相，样品看起来都挺纯的，不过都是在14分钟左右的样子出峰，担心混在一起之后分不开。果然混在一起进了一针液相图谱上分不开，还是在14-15分钟出了一个大峰，在混合体系中我该怎么调流动相把这两者分开，结构如图所示，我是个菜鸟，刚刚接触高效液相色谱，很多都不懂，还希望高人多多指教。

未命名.jpg
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1楼 2012-09-10 14:24:03
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

michaelye1800

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fxianlei: 金币+3 2012-09-12 06:22:24
这两个物质的疏水性差不多，用甲醇和水做流动相很难分开，可在流动相中添加少量的酸或碱，通过pH的差异来分离，加0.05%的三氟乙酸或0.05%的三乙胺；加酸可能更好些，一般柱子都不耐碱
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9楼2012-09-11 20:03:03
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fxianlei: 金币+2 2012-09-10 16:10:51
可以试着用buffer，调节一下pH，氨基可以质子化，酚羟基也可以解离的。
个人觉得高一点的pH有助于分离。
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七窍通了六窍
3楼2012-09-10 15:39:44
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普通回帖

deepwaterh

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fxianlei: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-10 16:10:58
用梯度洗脱试试，可以先试一下0~100，然后再根据情况调节合适的梯度。
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2楼2012-09-10 14:30:42
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fxianlei

木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by deepwaterh at 2012-09-10 14:30:42
用梯度洗脱试试，可以先试一下0~100，然后再根据情况调节合适的梯度。

直接选流动相，有没有什么好的方法，我是刚刚接触液相，很多的名词都不懂，就知道选流动相的比例
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4楼2012-09-10 16:16:33
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fxianlei

木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by platto at 2012-09-10 15:39:44
可以试着用buffer，调节一下pH，氨基可以质子化，酚羟基也可以解离的。
个人觉得高一点的pH有助于分离。

直接选流动相，有没有什么好的方法，我是刚刚接触液相，很多的名词都不懂，就知道选流动相的比例
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5楼2012-09-10 16:16:40
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fxianlei: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-11 12:34:16
水中加点三乙胺调整下PH，就分开了
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6楼2012-09-11 10:37:13
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fxianlei

木虫 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by liu2011 at 2012-09-11 10:37:13
水中加点三乙胺调整下PH，就分开了

用加了三乙胺的水做流动相？
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7楼2012-09-11 12:34:36
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liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
fxianlei: 金币+2 2012-09-11 13:12:15
fxianlei: 金币+2 2012-09-12 06:22:18
引用回帖:
7楼: Originally posted by fxianlei at 2012-09-11 12:34:36
用加了三乙胺的水做流动相？...

是的，能分开，我觉得能分开，你最好试一下
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8楼2012-09-11 13:04:39
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QAZ15000

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fxianlei: 金币+3 2012-09-12 06:22:33
同意加缓冲液，ph 5-6估计有戏
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努力再努力
10楼2012-09-11 20:13:38
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