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qissyumm

铁虫 (初入文坛)

[求助] 拟南芥转化后荚变白 不育

转化拟南芥一周后长出来的果荚变白不育。且浸泡过菌液的部分苔也是白的。从来没有遇到过这种情况,我刚换了一个实验室。方法没有问题一直用的浸泡法转化。哪位大侠给分析一下。我觉得是苗子状态不好造成的。大家畅所欲言。谢谢。
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
qissyumm: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-09-10 21:58:37
1 能否详细说说你的方法,转化时缓冲液用的是什么?楼主如果怀疑苗有问题,那转化前苗是什么样的。我自己做用沾花法,COL-0拟南芥,长到大概10 cm开始少量开花时转化。
2 也有可能你转化的基因表现型就是不育,这应该是很值得恭喜的事情
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-09-09 04:28:15
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qissyumm

铁虫 (初入文坛)

qissyumm: 回帖置顶 2012-09-10 21:59:02
转化液用的 5%蔗糖 10mmol MgCl2  0.005% silwet 77 。苔高10cm 。侵染7min 没有抽真空 。以前这么转化从来没出过问题。
3楼2012-09-09 12:16:32
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xiemin217

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
侵染7min,时间是不是太长了,我们一般是5-30s。
4楼2012-09-09 20:50:47
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qissyumm

铁虫 (初入文坛)

也有可能。我们一直用7min 转化效率 比较高。我下次 转化时间短一点。但是问题貌似找到了。温室 最近蚜虫非常厉害。还是植物状态不好造成的 。谢谢大家。
5楼2012-09-10 21:58:02
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elviswswei

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by qissyumm at 2012-09-09 12:16:32
转化液用的 5%蔗糖 10mmol MgCl2  0.005% silwet 77 。苔高10cm 。侵染7min 没有抽真空 。以前这么转化从来没出过问题。

你好,能不能给下你的protocol ,我的转化一直没出来结果,转化后花序也蔫了,好愁……
6楼2015-03-27 09:40:02
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elviswswei

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-09 04:28:15
1 能否详细说说你的方法,转化时缓冲液用的是什么?楼主如果怀疑苗有问题,那转化前苗是什么样的。我自己做用沾花法,COL-0拟南芥,长到大概10 cm开始少量开花时转化。
2 也有可能你转化的基因表现型就是不育,这应 ...

师兄(姐)你好,我的转化筛不出东西来,请问你是怎么做的,我用沾花法后,第二天花就蔫了,改怎么办?
7楼2015-03-27 09:42:13
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elviswswei

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by qissyumm at 2012-09-10 21:58:02
也有可能。我们一直用7min 转化效率 比较高。我下次 转化时间短一点。但是问题貌似找到了。温室 最近蚜虫非常厉害。还是植物状态不好造成的 。谢谢大家。

师兄你好,我的转化筛不出东西来,请问你是怎么做的,我用沾花法后,第二天花就蔫了,该怎么办?
8楼2015-03-27 09:43:15
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