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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 微生物培养与分子生物学 求助
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养活它

新虫 (初入文坛)

[求助] 微生物培养与分子生物学 求助

现在要做微生物的PCR技术试验，请问预先需要对菌种做筛选、纯化、鉴定吗？那对于金葡菌和大肠杆菌分别用什么方法筛选和鉴定？主要提供一些培养基或者生化技术。
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养活它

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1楼 2012-09-06 11:12:04
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-09-06 13:45:23
最好是做鉴定，金葡用普通培养基，大肠可以用伊红美蓝培养基或者麦康凯培养基；金葡可做糖发酵管试验、接触酶试验、凝固酶试验；大肠杆菌可做糖发酵管试验、吲哚试验、MR、VP试验、枸橼酸盐试验、三糖铁试验、尿脢试验等就可以了
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养活它
2楼2012-09-06 11:24:27
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养活它

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by weiyasong at 2012-09-06 11:24:27
最好是做鉴定，金葡用普通培养基，大肠可以用伊红美蓝培养基或者麦康凯培养基；金葡可做糖发酵管试验、接触酶试验、凝固酶试验；大肠杆菌可做糖发酵管试验、吲哚试验、MR、VP试验、枸橼酸盐试验、三糖铁试验、尿脢试 ...

谢谢您的回复。我还想追问一下，筛选大肠用什么培养基？筛选完了之后用什么方法鉴定对于做下一步的分子是最佳的？还有，金葡菌是不是可以用7.5%的Nacl肉汤培养基进行筛选？（文献上说的，您觉得如何？）
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3楼2012-09-06 22:41:48
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极应助 2012-09-07 09:16:15
引用回帖:
3楼: Originally posted by 养活它 at 2012-09-06 22:41:48
谢谢您的回复。我还想追问一下，筛选大肠用什么培养基？筛选完了之后用什么方法鉴定对于做下一步的分子是最佳的？还有，金葡菌是不是可以用7.5%的Nacl肉汤培养基进行筛选？（文献上说的，您觉得如何？）...

我在具体说下，1：先培养看看菌落形态：大肠杆菌最好的筛选培养基为伊红美蓝培养基（菌落略带金属光泽），麦康凯培养基为粉红色或红色菌落。金葡菌用普通培养基即可，为圆形、光滑菌落，白色或微黄色。
2：然后进行革兰氏染色，大肠杆菌为阴性菌，菌体为红色；金葡菌为阳性菌，为蓝紫色。
3：根据上述做生化试验，具体内容还是我上次说的。至于用7.5%的Nacl肉汤培养也可以，不过有的金葡菌不长，这个我以前做过。
4：最后根据上述3者，就可以初步判断是什么菌了，然后做分子生物学试验即可。
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4楼2012-09-07 08:47:14
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养活它

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
谢谢您！
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5楼2012-09-07 16:54:49
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