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养活它

新虫 (初入文坛)

[求助] 微生物培养与分子生物学 求助

现在要做微生物的PCR技术试验,请问预先需要对菌种做筛选、纯化、鉴定吗?那对于金葡菌和大肠杆菌分别用什么方法筛选和鉴定?主要提供一些培养基或者生化技术。
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-09-06 13:45:23
最好是做鉴定,金葡用普通培养基,大肠可以用伊红美蓝培养基或者麦康凯培养基;金葡可做糖发酵管试验、接触酶试验、凝固酶试验;大肠杆菌可做糖发酵管试验、吲哚试验、MR、VP试验、枸橼酸盐试验、三糖铁试验、尿脢试验等就可以了

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2楼2012-09-06 11:24:27
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养活它

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by weiyasong at 2012-09-06 11:24:27
最好是做鉴定,金葡用普通培养基,大肠可以用伊红美蓝培养基或者麦康凯培养基;金葡可做糖发酵管试验、接触酶试验、凝固酶试验;大肠杆菌可做糖发酵管试验、吲哚试验、MR、VP试验、枸橼酸盐试验、三糖铁试验、尿脢试 ...

谢谢您的回复。我还想追问一下,筛选大肠用什么培养基?筛选完了之后用什么方法鉴定对于做下一步的分子是最佳的?还有,金葡菌是不是可以用7.5%的Nacl肉汤培养基进行筛选?(文献上说的,您觉得如何?)
3楼2012-09-06 22:41:48
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weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小丹木木: 金币+3, MolEPI+1, 鼓励积极应助 2012-09-07 09:16:15
引用回帖:
3楼: Originally posted by 养活它 at 2012-09-06 22:41:48
谢谢您的回复。我还想追问一下,筛选大肠用什么培养基?筛选完了之后用什么方法鉴定对于做下一步的分子是最佳的?还有,金葡菌是不是可以用7.5%的Nacl肉汤培养基进行筛选?(文献上说的,您觉得如何?)...

我在具体说下,1:先培养看看菌落形态:大肠杆菌最好的筛选培养基为伊红美蓝培养基(菌落略带金属光泽),麦康凯培养基为粉红色或红色菌落。金葡菌用普通培养基即可,为圆形、光滑菌落,白色或微黄色。
2:然后进行革兰氏染色,大肠杆菌为阴性菌,菌体为红色;金葡菌为阳性菌,为蓝紫色。
3:根据上述做生化试验,具体内容还是我上次说的。至于用7.5%的Nacl肉汤培养也可以,不过有的金葡菌不长,这个我以前做过。
4:最后根据上述3者,就可以初步判断是什么菌了,然后做分子生物学试验即可。
4楼2012-09-07 08:47:14
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养活它

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
谢谢您!
5楼2012-09-07 16:54:49
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