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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 扫描电镜样品前处理
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xkc465540407

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 416114799 at 2012-09-03 20:18:12
按以下步骤制备扫描电镜样品： 2.5%戊二醛固定 4 h→磷酸缓冲液洗涤 3 次→乙醇梯度脱水（分别为 30%、50%、70%、85%、90%乙醇各 1 次，100%乙醇 2 次，15 min/次）→
乙酸异戊酯置换乙醇 2 次（20 min/次），每一 ...

您冷冻干燥仪的温度是多少度？谢谢你啊
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71楼2018-01-26 16:58:15
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15967146300

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 416114799 at 2012-09-03 20:18:12
按以下步骤制备扫描电镜样品： 2.5%戊二醛固定 4 h→磷酸缓冲液洗涤 3 次→乙醇梯度脱水（分别为 30%、50%、70%、85%、90%乙醇各 1 次，100%乙醇 2 次，15 min/次）→
乙酸异戊酯置换乙醇 2 次（20 min/次），每一 ...

您好，我想请问一下，SEM我是去浙大做的，我不明白其中一个步骤是PBS洗戊二醛和饿酸的时候为什么需要等待15min？麻烦您能抽出时间回复一下
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72楼2018-06-05 16:05:57
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
71楼: Originally posted by xkc465540407 at 2018-01-26 16:58:15
您冷冻干燥仪的温度是多少度？谢谢你啊...

冷冻干燥仪还有温度？

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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
73楼2018-06-05 18:55:28
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
72楼: Originally posted by 15967146300 at 2018-06-05 16:05:57
您好，我想请问一下，SEM我是去浙大做的，我不明白其中一个步骤是PBS洗戊二醛和饿酸的时候为什么需要等待15min？麻烦您能抽出时间回复一下...

为了洗得更彻底啊！

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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
74楼2018-06-05 18:55:40
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lcp0802

铜虫 (小有名气)
@416114799, 您好，您解释的非常详细，很有帮助。但是我还是不明白一个地方，乙醇梯度处理的时候，为什么要用磷酸缓冲溶液来配啊？这个操作会引入水啊？ 还是只有当乙醇浓度低于100%是采用磷酸缓冲溶液，最后一步直接使用100%乙醇。谢谢！
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75楼2018-09-13 11:22:13
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790381471

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
74楼: Originally posted by 416114799 at 2018-06-05 18:55:40
为了洗得更彻底啊！
...

至尊大神，我做血小板黏附，戊二醛固定在常温会对它产生什么影响？还有就是我没有冷冻干燥和临界点干燥，但是做出来发现血小板干巴巴的，瘪瘪的，这是因为没有干燥的问题吗？但是我已经脱水与脱醇了啊
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76楼2019-05-28 15:55:26
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耀日光

新虫 (小有名气)
引用回帖:
74楼: Originally posted by 416114799 at 2018-06-05 18:55:40
为了洗得更彻底啊！
...

您好，我最近在做金葡和大肠的扫描电镜，菌体总是会破裂，请问应该注意什么步骤那？

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77楼2019-12-23 00:09:59
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苹果菠萝

新虫 (小有名气)
送红花一朵
楼主您好，我想问一下关于第二部磷酸缓冲液清洗三遍2.5%的戊二醛，这个部分的磷酸缓冲液具体的pH是多少，这个pH影响什么
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78楼2020-06-21 20:20:43
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苹果菠萝

新虫 (小有名气)
最后一步必须冷冻干燥吗，自然风干可以吗
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79楼2020-06-21 20:21:17
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hnsfdj

金虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 416114799 at 2012-09-03 20:18:12
按以下步骤制备扫描电镜样品： 2.5%戊二醛固定 4 h→磷酸缓冲液洗涤 3 次→乙醇梯度脱水（分别为 30%、50%、70%、85%、90%乙醇各 1 次，100%乙醇 2 次，15 min/次）→
乙酸异戊酯置换乙醇 2 次（20 min/次），每一 ...

您好 有一个小问题想请教您。我的菌固体比较多，用的100ml大离心管，缓冲液或者梯度乙醇在和离心后的菌固体混合后，可以用涡旋的办法混匀菌与乙醇吗？这样做会不会影响细胞形态？因为菌固体比较多都粘附在离心管底部，移液枪头吹吸不能混合均匀
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80楼2022-03-07 16:48:41
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