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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 扫描电镜样品前处理
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
56楼: Originally posted by nie0212 at 2014-07-10 08:40:36
您好！我想问一下处理好的菌体怎么弄到载物台上拍照片...

负责拍的会弄的啊！双面胶粘在载物台上。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
61楼2015-04-08 00:09:23
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
57楼: Originally posted by chenmeimei123 at 2014-10-22 17:49:04
亲，我前后看完您对大家的回复了，赞一个！本人学科跨度比较大，能不能详细些一下2.5%戊二醛 和各个梯度酒精的配制啊？谢谢，另外，如果没有冷冻干燥，如果有临界点干燥也是一样的吧？  如果两个都没用，不知道还有 ...

百度。

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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
62楼2015-04-08 00:10:05
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
57楼: Originally posted by chenmeimei123 at 2014-10-22 17:49:04
亲，我前后看完您对大家的回复了，赞一个！本人学科跨度比较大，能不能详细些一下2.5%戊二醛 和各个梯度酒精的配制啊？谢谢，另外，如果没有冷冻干燥，如果有临界点干燥也是一样的吧？  如果两个都没用，不知道还有 ...

临界点可以。ESEM

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
63楼2015-04-08 00:10:55
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angledudu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 416114799 at 2012-09-03 20:18:12
按以下步骤制备扫描电镜样品： 2.5%戊二醛固定 4 h→磷酸缓冲液洗涤 3 次→乙醇梯度脱水（分别为 30%、50%、70%、85%、90%乙醇各 1 次，100%乙醇 2 次，15 min/次）→
乙酸异戊酯置换乙醇 2 次（20 min/次），每一 ...

恁好，想问一下，样品处理的时候，菌体量多少比较合适？哪一步往载玻片上点？
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64楼2015-09-28 16:57:45
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
64楼: Originally posted by angledudu at 2015-09-28 16:57:45
恁好，想问一下，样品处理的时候，菌体量多少比较合适？哪一步往载玻片上点？...

一点点就够看了。sem放大1w多倍有几个菌就够啦

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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
65楼2015-09-29 00:09:07
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angledudu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
65楼: Originally posted by 416114799 at 2015-09-29 00:09:07
一点点就够看了。sem放大1w多倍有几个菌就够啦
...

66楼2015-10-12 21:33:32
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璐太弯

新虫 (正式写手)
引用回帖:
65楼: Originally posted by 416114799 at 2015-09-29 00:09:07
一点点就够看了。sem放大1w多倍有几个菌就够啦
...

脱水后，可以自然干燥吗？此时菌分散在什么液体里好，最后滴加到硅片上，旋涂分散，菌浓度多大比较好。
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67楼2015-10-16 21:27:54
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
请了解sem原理

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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
68楼2015-10-17 07:43:04
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416114799

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
67楼: Originally posted by 璐太弯 at 2015-10-16 21:27:54
脱水后，可以自然干燥吗？此时菌分散在什么液体里好，最后滴加到硅片上，旋涂分散，菌浓度多大比较好。...

请了解sem原理

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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
69楼2015-10-17 07:43:30
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安格洛

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 416114799 at 2012-09-03 20:18:12
按以下步骤制备扫描电镜样品： 2.5%戊二醛固定 4 h→磷酸缓冲液洗涤 3 次→乙醇梯度脱水（分别为 30%、50%、70%、85%、90%乙醇各 1 次，100%乙醇 2 次，15 min/次）→
乙酸异戊酯置换乙醇 2 次（20 min/次），每一 ...

嗨，您好，之前看了您关于细菌SEM电镜制样的回复，感觉您应该是这方面的行家，不知道您也能给与相关的帮助。
是这样的，我也是一直在做SEM方法基本上现将菌体离心，在用超纯水清洗培养基等，在加入2.5%的戊二醛磷酸缓冲液进行固定2-4个小时，在用超纯水清洗里面的盐类物质几次，在用乙醇梯度脱水，最后用叔丁醇置换脱水，再干燥。但是每次拍出的样品菌体基本上是埋没在其中，并不分散，不知道您能否愿意分享相关经验
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