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humourhy

新虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by 416114799 at 2012-09-06 14:02:51
冷冻干燥的目的一是出去结合水,使电镜时不会被干扰。还有就是为了形态稳定,毕竟在处理过程中有了固定化的步骤。你还是好好理解下各个步骤的原理吧...

您好~我是在多孔聚酯支架上种细胞,然后放在SEM下观察~准备按照您提供的固定脱水细胞的方法来试一下~
我想请教下您两个问题 乙酸异戊酯替换乙醇这一步是不是决定性的一步呢,因为我的高分子支架很可能就被溶解了,所以这一步不做是否有实质性的影响?最后一步干燥过程,因为我们实验室的冷冻干燥剂不能控温,所以做不到您提供方法如此精细的冷冻干燥,所以我在想,直接在梯度脱水后室温下风干或者真空干燥是否可以呢?
非常期待您的解答~
11楼2012-09-29 10:25:35
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
11楼: Originally posted by humourhy at 2012-09-29 10:25:35
您好~我是在多孔聚酯支架上种细胞,然后放在SEM下观察~准备按照您提供的固定脱水细胞的方法来试一下~
我想请教下您两个问题 乙酸异戊酯替换乙醇这一步是不是决定性的一步呢,因为我的高分子支架很可能就被溶解了 ...

可以的哦,其实置换只是为了把乙醇除去,其实乙醇本来就很容易挥发的。我师姐做过没有用乙酸异戊酯置换的,效果也可以的啊。不影响哦

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
12楼2012-09-30 08:31:31
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humourhy

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by 416114799 at 2012-09-30 08:31:31
可以的哦,其实置换只是为了把乙醇除去,其实乙醇本来就很容易挥发的。我师姐做过没有用乙酸异戊酯置换的,效果也可以的啊。不影响哦...

soga~非常感谢
13楼2012-10-01 18:27:05
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哇哈哈VS可乐

银虫 (小有名气)

你好,我想问一下,我的样品有容易跟PBS反应的CU,我要用什么东西去清洗样品好
人之所以活着,是因为上天赋予了他一定的使命,我们就要为了这个使命,活得轰轰烈烈。
14楼2012-11-05 18:15:28
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哇哈哈VS可乐

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 416114799 at 2012-09-03 20:18:12
按以下步骤制备扫描电镜样品: 2.5%戊二醛固定 4 h→磷酸缓冲液洗涤 3 次→乙醇梯度脱水(分别为 30%、50%、70%、85%、90%乙醇各 1 次,100%乙醇 2 次,15 min/次)→
乙酸异戊酯置换乙醇 2 次(20 min/次),每一 ...

你好,我现在在做SEM的预处理,我想问一下,我的样品容易跟PBS反应,我要怎么处理。。。
人之所以活着,是因为上天赋予了他一定的使命,我们就要为了这个使命,活得轰轰烈烈。
15楼2012-11-05 18:19:37
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哇哈哈VS可乐

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 416114799 at 2012-09-03 20:18:12
按以下步骤制备扫描电镜样品: 2.5%戊二醛固定 4 h→磷酸缓冲液洗涤 3 次→乙醇梯度脱水(分别为 30%、50%、70%、85%、90%乙醇各 1 次,100%乙醇 2 次,15 min/次)→
乙酸异戊酯置换乙醇 2 次(20 min/次),每一 ...

扫描电镜前样品预处理
人之所以活着,是因为上天赋予了他一定的使命,我们就要为了这个使命,活得轰轰烈烈。
16楼2012-11-06 08:29:58
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 哇哈哈VS可乐 at 2012-11-06 08:29:58
扫描电镜前样品预处理...

我的这个处理方法只是针对微生物,PBS是起缓冲液作用,不至于细胞变行之类的。我不知道你要处理什么样品呢?
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
17楼2012-11-06 09:26:56
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哇哈哈VS可乐

银虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 416114799 at 2012-11-06 09:26:56
我的这个处理方法只是针对微生物,PBS是起缓冲液作用,不至于细胞变行之类的。我不知道你要处理什么样品呢?...

因为我的样品上面有单质铜,如果用PBS就会有产生磷酸铜沉淀。。。
人之所以活着,是因为上天赋予了他一定的使命,我们就要为了这个使命,活得轰轰烈烈。
18楼2012-11-08 08:43:38
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

引用回帖:
18楼: Originally posted by 哇哈哈VS可乐 at 2012-11-08 08:43:38
因为我的样品上面有单质铜,如果用PBS就会有产生磷酸铜沉淀。。。...

如果你也是微生物的,用缓冲液按理是必须的,否则就会变形,但是如果你对微生物的整体形貌观察要求不是非常高。比如说只是想知道是杆状还是球状,是长是短等,那不用PBS应该也是不会有大问题的吧。你肯定是要观察材料对CU的负载,所以要保住Cu,反而材料的具体形态可能是次要的。你觉得呢?
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
19楼2012-11-08 09:17:02
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哇哈哈VS可乐

银虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 416114799 at 2012-11-08 09:17:02
如果你也是微生物的,用缓冲液按理是必须的,否则就会变形,但是如果你对微生物的整体形貌观察要求不是非常高。比如说只是想知道是杆状还是球状,是长是短等,那不用PBS应该也是不会有大问题的吧。你肯定是要观察材 ...

确实。。。。。您说的在理
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20楼2012-11-09 08:46:49
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