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关于用摇床振荡培养时的几个问题。
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首次用摇床振荡培养一种真菌，有几个问题想请教大家： 1、为什么文献上都是摇7d呢，若有事耽搁了，多摇了几天会有什么问题？ 2、接下来要做活性成分分析的话，不知道大家是哪种方法？看文献有先抽滤，将菌丝和发酵液分离，然后分别浓缩、萃取、色谱之类的；还有的是将全部发酵的东西超声破碎，然后离心取上清、浓缩等等。或者还有更好的方法？ 3、不知道大家那些参数（时间、温度、转速）是怎么确定的？ |
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cheauyn
铁杆木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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| 摇7天是根据菌的生长情况确定的，或者可以说7天的时候产物量最高。真如你说的有事耽搁了，那之前的七天就白做了。发酵结束后的处理方法是根据产物是属于胞内还是胞外确定的，你之前说的先抽滤再处理的是胞外产物。先细胞破碎再处理是测的胞内产物。不是大家怎么做就怎么做的。培养条件要进行条件优化确定。也可根据文献先有一个大概的培养条件。然后自己再进行更进一步的优化。 |
7楼2012-08-30 10:59:18
gezhijiang
木虫 (正式写手)
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2楼2012-08-29 14:27:23
【答案】应助回帖
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1. 文献中培养7天一般是具体培养条件下产量的平台期，建议你在确定条件的情况下做一个动态或者半动态产量以及细胞量分析，找到对数期以及平台期这样你就知道哪天结束发酵最合适 2.活性成分分析方面，你首先要确定活性物质是胞内还是胞外，建议你分开，取样之后离心将上清和细胞分别处理，上清用各种溶剂萃取，细胞超声破碎或者低温烘干后研磨后，溶剂萃取，初期做的话建议先简单萃取直接HPLC-MS来鉴定物质，后期需要大量纯品时在浓缩，柱子之类的分离。可以看相关文献总结。 3.培养条件这个你可以采取单因素或者做一个PB设计简单搞定 |
3楼2012-08-29 20:57:46
4楼2012-08-29 22:50:43
