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seven9870

新虫 (小有名气)

[求助] 关于用摇床振荡培养时的几个问题。

首次用摇床振荡培养一种真菌,有几个问题想请教大家:
1、为什么文献上都是摇7d呢,若有事耽搁了,多摇了几天会有什么问题?
2、接下来要做活性成分分析的话,不知道大家是哪种方法?看文献有先抽滤,将菌丝和发酵液分离,然后分别浓缩、萃取、色谱之类的;还有的是将全部发酵的东西超声破碎,然后离心取上清、浓缩等等。或者还有更好的方法?
3、不知道大家那些参数(时间、温度、转速)是怎么确定的?
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bjck2008

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rainwander: 金币+3, MicEPI+1, 鼓励交流 2012-08-30 08:13:39
1. 文献中培养7天一般是具体培养条件下产量的平台期,建议你在确定条件的情况下做一个动态或者半动态产量以及细胞量分析,找到对数期以及平台期这样你就知道哪天结束发酵最合适
2.活性成分分析方面,你首先要确定活性物质是胞内还是胞外,建议你分开,取样之后离心将上清和细胞分别处理,上清用各种溶剂萃取,细胞超声破碎或者低温烘干后研磨后,溶剂萃取,初期做的话建议先简单萃取直接HPLC-MS来鉴定物质,后期需要大量纯品时在浓缩,柱子之类的分离。可以看相关文献总结。
3.培养条件这个你可以采取单因素或者做一个PB设计简单搞定
3楼2012-08-29 20:57:46
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gezhijiang

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
seven9870: 金币+1, 有帮助 2012-09-05 10:06:56
先查查文献,不同的真菌不一样的,,有的长的速度快,有的慢,,我的三天就下摇床,时间长了就自溶了
2楼2012-08-29 14:27:23
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hgp101

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
seven9870: 金币+1, 有帮助 2012-09-05 10:07:08
不同的菌种不一样的,摇七天似乎太长了,一般三四天就到稳定期
从事生态环境监测工作
4楼2012-08-29 22:50:43
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hotchange

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-30 08:13:51
seven9870: 金币+2, 有帮助 2012-09-05 10:07:27
不同菌种时间不同,可以每天去观察一下,养长了时间菌种形态可能会发生变化的
2查文献如果可以确定峰值,跑跑液相
3单因素加正交,要耐心

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2012-08-29 23:17:27
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