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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 胶体金诊断试纸T线不显色
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华俊

金虫 (小有名气)

[求助] 胶体金诊断试纸T线不显色

请求各位大侠指教：
导师给的课题是做一种吸虫的免疫胶体金诊断试纸，小妹做了，构建的是夹心法，检测抗原的，金表单抗，T线处无论用单抗还是多抗喷涂，使用抗原稀释后检测还是用阳性样本，都不显示，但是C线使用羊抗兔显示很好，不知道为什么，难道是抗体标记中失活啦，为什么C线显示很好呢？请各位指点，小妹重谢啦！
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多一份快乐少一分烦恼！
1楼2012-08-28 00:17:10
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华俊

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by beliebetray at 2012-08-28 16:37:01
你的抗体是通过免疫BALB/C小鼠得到的吗？22KD的蛋白分子量太小，没有免疫原性，要偶联其他蛋白后才行，所以我觉得可能是因为你的蛋白太小了，抗体没法识别。。所以T line没有显色。

恩恩，太感谢啦，但是我的金标的单抗是用ES抗原免疫制备的，多抗是免疫兔子制备的，
呜呜......我干怎么办呢，怎么办呢？
谢谢大侠指点啦！！！
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多一份快乐少一分烦恼！
6楼2012-08-28 23:26:05
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beliebetray

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
华俊: 金币+1, ★有帮助, 指出了问题，但是还没帮解答，谢谢 2012-08-28 15:40:50
你的抗体效价怎样？抗原是半抗原？
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2楼2012-08-28 12:22:32
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华俊

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by beliebetray at 2012-08-28 12:22:32
你的抗体效价怎样？抗原是半抗原？

谢谢你！
抗体的效价在1:1000以上，我在建立的ELISA方法中，10微克每毫升包被效果 很好，我想这个没问题，
至于是不是半抗原我也不是很清楚，但是我标记的抗体就是用吸虫ES抗原免疫的，根据我们实验室对此ES抗原的分析，其中最小蛋白分子量为22KD，至于我所使用的抗体能捕获ES中的那个成分不是很清楚啦，师姐毕业了，也没有分析，
所以我推测，抗原不是半抗原，加入时半抗原的话，我用该如何做呢？谢谢你的指导！！！
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多一份快乐少一分烦恼！
3楼2012-08-28 15:39:22
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华俊

金虫 (小有名气)
效价是1:10000以上
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多一份快乐少一分烦恼！
4楼2012-08-28 15:43:00
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