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华俊

金虫 (小有名气)

[求助] 胶体金诊断试纸T线不显色

请求各位大侠指教:
导师给的课题是做一种吸虫的免疫胶体金诊断试纸,小妹做了,构建的是夹心法,检测抗原的,金表单抗,T线处无论用单抗还是多抗喷涂,使用抗原稀释后检测还是用阳性样本,都不显示,但是C线使用羊抗兔显示很好,不知道为什么,难道是抗体标记中失活啦,为什么C线显示很好呢?请各位指点,小妹重谢啦!
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华俊

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by beliebetray at 2012-08-28 12:22:32
你的抗体效价怎样?抗原是半抗原?

谢谢你!
抗体的效价在1:1000以上,我在建立的ELISA方法中,10微克每毫升包被效果 很好,我想这个没问题,
至于是不是半抗原我也不是很清楚,但是我标记的抗体就是用吸虫ES抗原免疫的,根据我们实验室对此ES抗原的分析,其中最小蛋白分子量为22KD,至于我所使用的抗体能捕获ES中的那个成分不是很清楚啦,师姐毕业了,也没有分析,
所以我推测,抗原不是半抗原,加入时半抗原的话,我用该如何做呢?谢谢你的指导!!!
多一份快乐少一分烦恼!
3楼2012-08-28 15:39:22
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beliebetray

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
华俊: 金币+1, 有帮助, 指出了问题,但是还没帮解答,谢谢 2012-08-28 15:40:50
你的抗体效价怎样?抗原是半抗原?
2楼2012-08-28 12:22:32
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华俊

金虫 (小有名气)

效价是1:10000以上
多一份快乐少一分烦恼!
4楼2012-08-28 15:43:00
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beliebetray

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
华俊: 金币+4, ★★★很有帮助, 非常感谢啦!!! 2012-08-28 23:27:56
你的抗体是通过免疫BALB/C小鼠得到的吗?22KD的蛋白分子量太小,没有免疫原性,要偶联其他蛋白后才行,所以我觉得可能是因为你的蛋白太小了,抗体没法识别。。所以T line没有显色。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2012-08-28 16:37:01
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