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zhang_hbnu

金虫 (正式写手)

[求助] 提取螺、螃蟹的基因组DNA怎么才能解决降解问题,求助!

近来提取螺、螃蟹的基因组DNA,不知道是方法的问题,还是别的问题,严格按照方法提取了好几次,都存在降解,最好的可以看见主带,但是还是有将为多的降解,求助!
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+5, BioEPI+1, 2012-08-27 12:43:44
你是用的什么方法?用液氮吗?最重要的就是研磨过程,做的越多效果也越好,多练习。
DNA的降解主要问题来源于化学损伤和物理损伤。
从化学角度来说,就是提取的环境,可以加入一些保护剂,同时还可以有效去除蛋白质等杂质,比如SDS,EDTA等,还有一些蛋白酶也有一些效果。多查查文献,肯定有关于这方面的工作。
从物理上说,主要是提取过程要快速有效,动作轻柔,特别是混匀,研磨过程。
在提基因组过程中不可避免的都会有一定程度的降解,只能是减少降解。所以多练习会有效果的。
当然,还有一个笨办法,基因组的提取一般浓度都会比较高,如果多次练习后还不能有效降低降解的问题,可以提基因组后再利用胶回收试剂盒跑胶回收一次,之前我同学和我讨论时说起用这个方法做过,能够完全解决这个问题。
2楼2012-08-27 12:10:34
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2012xiaoyao

银虫 (初入文坛)

★
yqbter: 金币+1, 鼓励新虫发帖! 2012-10-17 13:31:30
学习了
终于升到这个级别了
3楼2012-10-17 10:22:11
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