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月下飞雪

金虫 (小有名气)

[求助] 快速制备色谱上分离问题

在用快速制备液相分离时,分得三个峰,分的很开,但是,第二个峰和第三个峰旋干发现几乎没东西,把第一个峰旋干,再次进制备,发现得到和初次的三个峰一样的峰(出峰时间一样),这是怎么回事,求指点呀,用的120克C18反相柱,水和甲醇为流动相
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氢化大雪

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-30 13:33:03
月下飞雪: 金币+5 2012-09-06 08:46:31
第一个峰在旋蒸的时候分解了,分解成第二个、第三个。还有可能是检测器波长没有调好,你的峰是溶剂或其他物质干扰峰。有标样的话建议加标看看
美酒香茗
15楼2012-08-30 12:42:21
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Bryant_x

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢啦 2012-08-25 08:34:53
月下飞雪: 金币+5 2012-09-06 08:43:58
你用的是自动馏分接收器吗?还有你的上样量、流速是多大?你第一个峰和后两个峰的吸收值是多大?你可以先减小上样量试试
2楼2012-08-25 01:40:36
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ask_cl2008

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+2, 鼓励新虫 2012-08-25 08:34:10
月下飞雪: 金币+20, 有帮助 2012-09-06 08:43:43
1.将你所要分离的产品从HPLC按正常程序走一遍,直至没有其他峰出现,即可停止;
2.对比你要的产品出峰时间及位置;
3.进样时,流速调慢,也就相当于柱纯化,便于收集所要产品及杂质,为了更好地有效分离;
4.一定要将前面1的HPLC图谱进行对比制备液相所走的时间及峰值曲线,这样就能更好的把控;
5.如果流动性不行,赶紧换成你检验你产品用的溶剂(比如粗品,成品的方法)。
6.C18柱子不可行的话,建议更换。
3楼2012-08-25 08:11:25
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clcivilian

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢啦 2012-08-25 08:34:43
月下飞雪: 金币+10 2012-09-06 08:44:12
本帖内容被屏蔽

4楼2012-08-25 08:20:00
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