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简单HE认真

木虫 (小有名气)

[求助] 包涵体蛋白纯化不溶解,怎麽办?已有2人参与

菌体定位后,目的蛋白在沉淀中,即包涵体表达,但是包含体没办法溶解,请教一下各位该怎麽办?顺便问一下,可否加一点表变活性剂或乙醇以增加疏水性蛋白的溶解...
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简单做人,认真做事。
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gelois

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-08-21 16:16:14
引用回帖:
10楼: Originally posted by 简单HE认真 at 2012-08-20 14:45:46
15度又到有点太低了吧,我们过夜通常是20-25度的.......

15度的话,因为一般摇床温度再低也不会低到15的,显示是15度,其实温度一般都是在18度左右的,那个时候细菌生长比较缓慢,蛋白折叠的也就会缓慢正确的多。你们用20-25,应该是也行的。
12楼2012-08-20 15:32:09
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会思想的芦苇

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 可以 2012-08-23 16:58:21
8M 尿素溶解不了?用超声波辅助一下试试
2楼2012-08-18 16:56:27
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xiongyaoling

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般用8M脲素或6M的盐酸胍可以溶解的。超声助溶
3楼2012-08-18 18:36:31
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xuyihui2001

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加些DTT或巯基乙醇1-3%
4楼2012-08-19 09:16:09
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