24小时热门版块排行榜    

查看: 821  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

761429495

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化

求助:木聚糖酶已经在毕赤酵母中表达了,接下来想做酶蛋白纯化,我打算通过PCR重新构建质粒给目的基因加上组氨酸标签,应该以ppic-9k全长基因为模版还是一个片段为模版呢,初学者求指导,谢谢啊:t
回复此楼

» 猜你喜欢

每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

761429495

新虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by yandz680717 at 2012-08-20 05:55:15
注意His tag加在N端可能对酶的活性有影响,看看文献

引物        长度(bp)        序列(5’→3’)
Xyn-1         25              ATGGTTGCCTTTACTTCCCTTCTCG
Xyn-2        25              TAGCTGACAGTGATGGAAGCAGAGC
亲,我想问一下我给这个上游引物加6个组氨酸标签序列的话,是不是变为
CATCATCATCATCATCATATGGTTGCCTTTACTTCCCTTCTCG:组氨酸不是有两个密码子吗,该如何选择呢?求指导。。。

每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
12楼2012-08-20 14:22:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

哈哈大姑爷

至尊木虫 (知名作家)

感谢参与,应助指数 +1
scelab: 应助指数-1, 酱油的 2012-08-17 12:14:35
路过,看看有没有酱油
GO ON
2楼2012-08-16 22:55:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

761429495

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 哈哈大姑爷 at 2012-08-16 22:55:19
路过,看看有没有酱油

有没有建设性的意见啊
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
3楼2012-08-17 13:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以在目的基因的一端引物中加上His的编码,重新PCR后和载体片段连接

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-08-17 16:03:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见