应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 启动子替换
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1817  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

清水一杯

新虫 (初入文坛)

[求助] 启动子替换

我最近准备做一个试验，希望通过替换出发菌株的启动子，构建一株目的基因簇高水平表达的工程菌。
基本试验设计：利用double cross-over同源整合，在外源启动子两侧分别加入靶标启动子的5'和3'序列。
问题：利用上述方法，电激转化出发菌株后能否成功获得启动子被替换的重组工程菌？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-08-15 17:14:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-15 20:49:42
是相当于同源重组，但还应该在替换的启动子上游加上筛选标记。
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-15 20:19:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

xbl3688

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-15 20:49:35
貌似是可以的，算是一个同源重组。但是需要经过单交换--双交换的过程（也可能直接双交换一步完成，但是概率很低），问题是你要电转化的质粒能不能在宿主里稳定存在、传代。另外上游和下游同源序列的长度在几百~1000bp比较合适。
赞一下 回复此楼
生活的乐趣在于善于发现美，学会欣赏美
2楼2012-08-15 18:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

默默的等待

金虫 (正式写手)
感觉有点难度 首先你替换的启动子能能保证在此菌株中一定能高表达吗？做预实验没 ，再次启动子片段大小啊   个人感觉
赞一下 回复此楼
4楼2012-08-16 16:39:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

406856929

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

应该是可以的，采用双交换后，不需要进行电转化，可通过接合转移的方法，让启动子自行替换，但是这样需要一个遗传操作质粒来帮助接合上去，这个质粒需要在目的菌里面能够存活，质粒是关键
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-16 13:33:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 304求调剂（085602，过四级，一志愿985） +6 化工人999 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:37 by 啊李999
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-04 20:37 by 蓝云思雨
[考研] 301求调剂 +18 骆驼男人 2026-04-02 18/900 2026-04-04 20:33 by 蓝云思雨
[考研] 277工科求调剂 +7 1915668 2026-04-04 7/350 2026-04-04 17:21 by 啊俊！
[考研] 一志愿沪985，326分求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-03 3/150 2026-04-04 11:16 by 悲伤的芋头
[考研] 400分求调剂 +3 尴尬且挠头 2026-04-04 3/150 2026-04-04 08:41 by jp9609
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
[考研] 本科985，专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 336求调剂 +8 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-03 19:41 by lijunpoly
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +13 hanamiko 2026-04-01 13/650 2026-04-03 18:30 by ls刘帅
[考研] 材料专硕322分 +13 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 13/650 2026-04-03 16:08 by 哦哦123
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 9/450 2026-04-03 12:05 by 1753564080
[考研] 26考研调剂 +4 Wnz.20030617 2026-04-01 5/250 2026-04-02 16:11 by 1939136013狗壮
[考研] 材料化工340求调剂 +5 jhx777 2026-03-30 5/250 2026-04-02 12:45 by smileboy2006
[考研] 298求B区调剂 +4 zzz，，r 2026-04-02 5/250 2026-04-02 12:17 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +9 双马尾痞老板2 2026-04-01 9/450 2026-04-02 12:14 by oooqiao
[考研] 生物与医药考研调剂 +5 铁憨憨123425 2026-03-31 5/250 2026-04-01 18:01 by syh9288
[考研] 考研生物与医药调剂 +7 铁憨憨123425 2026-03-31 7/350 2026-04-01 08:45 by JourneyLucky
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭