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清水一杯

新虫 (初入文坛)

[求助] 启动子替换

我最近准备做一个试验,希望通过替换出发菌株的启动子,构建一株目的基因簇高水平表达的工程菌。
基本试验设计:利用double cross-over同源整合,在外源启动子两侧分别加入靶标启动子的5'和3'序列。
问题:利用上述方法,电激转化出发菌株后能否成功获得启动子被替换的重组工程菌?
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新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

应该是可以的,采用双交换后,不需要进行电转化,可通过接合转移的方法,让启动子自行替换,但是这样需要一个遗传操作质粒来帮助接合上去,这个质粒需要在目的菌里面能够存活,质粒是关键
5楼2013-01-16 13:33:41
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