| 查看: 4735 | 回复: 9 | |||||
| 本帖产生 1 个 ACI ，点击这里进行查看 | |||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||||
[求助]
求助LC-MS-MS定量问题
|
|||||
|
LC-MS-MS如何进行定量分析？ 我想用LC-Q-TOF-MS 来做代谢组学，因为是样品是体液含有多种化合物，想加入内标后先进行一个相对的定量来判断含量发生变化的化合物。所以问题就是怎样去定量，用总离子流图好像不合适，因为每个峰对应着很多碎片离子，对单个碎片离子进行选择粒子流图积分时，峰面积明显有变化（比如说在总TIC图中是一个很小的峰，选择这个峰对应的某个荷质比进行选择粒子流图积分时峰明显变高），我想问如果利用峰面积进行相对定量的话，应该用哪个图比较合适？ 我听我们管仪器的老师说的意思好像是要用二级质谱图来进行定量，而且定量时要选择这个物质的特征峰来进行定量 还有一个问题就是定性的问题，必须得用标准品才能定性吗？ 在理想条件下，如果物质分的特别开的话，总离子流图的每个峰是不是代表一种物质吗？这个峰对应的碎片是不是，这个物质被打成的碎片。 哎呀，好多问题啊，我一直对也只定量定性不明白，因为我看文献中液质就跑出几个峰，为什么会检测到几十种物质，不明白，麻烦各位大侠啦，求解答，万分感谢！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 高效液相 | 液质资料 | 化学实验相关 |
» 猜你喜欢
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有123人回复
-
今天基金会出结果吗？20260819
已经有13人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有16人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有13人回复
-
为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？
已经有5人回复
-
今天放榜没戏了吧
已经有5人回复
-
今天放榜吗？
已经有15人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有12人回复
-
2027广东省杰青
已经有10人回复
-
朋友圈看到的
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【求助】LCMS做药代时样品和内标的保留时间是否要相近呢？
已经有24人回复
- 【求助】lc-ms/ms方法介绍，定量原理
已经有9人回复
- 【求助】请教：LC-MS 选购问题？谢谢大家！
已经有4人回复
- 【求助】请问LC-MS高手，可曾看见[M+H+H2O]+的准分子离子峰？
已经有5人回复
- 【求助】LC-MS重大问题，高手进
已经有16人回复
- 【求助】有关LC-MS的谱图问题
已经有4人回复
- 【求助】用过waters LC-MS的请进
已经有14人回复
lzjessie_wlf
金虫 (小有名气)
- ACI: 16
- 应助: 85 (初中生)
- 金币: 1007.2
- 红花: 9
- 帖子: 290
- 在线: 108.7小时
- 虫号: 1607967
- 注册: 2012-02-09
7楼2012-08-13 21:08:32
lzjessie_wlf
金虫 (小有名气)
- ACI: 16
- 应助: 85 (初中生)
- 金币: 1007.2
- 红花: 9
- 帖子: 290
- 在线: 108.7小时
- 虫号: 1607967
- 注册: 2012-02-09
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
soundhorizo: 金币+5, 感谢您认真应助 ^^ 2012-08-10 19:58:26
soundhorizo: ACI+1 2012-08-13 21:20:40
soundhorizo: 金币+5, 感谢您认真应助 ^^ 2012-08-10 19:58:26
soundhorizo: ACI+1 2012-08-13 21:20:40
|
LCMS 定量分析使用SIM 或MRM模式。公认的MRM更为准确。SIM使用Q选择性的滤过选中的分子量。但是分子量相同的化合物很多，所以，如果样品稍微复杂的话，SIM基本不合适。 MRM选择母离子和子离子。使用Q过滤母离子，q 轰击母离子，TOF过滤子离子，使子离子被检测器检测到。分子量相同，轰击后产生的子离子不一样的干扰离子就被排除了。所以，MRM模式是更为可靠的LC-MS定量分析方法。MRM检测是离子对。 内标的选择原理是结构基本和待测化合物类似。结构相同或类似，主要是为了满足被离子化的效率与样品类似。这就是为什么很多都选择使用该化合物或此类化合物的氘代试剂。化合物的分子量与待测物质不重合(还需要尽量避开化合物的isotopic peak的m/z)，基本可以和待测物质分开。 如果使用MRM, 样品被分开的话，那么理论上来说总离子流图上的每个峰都是代表一种物质。同时使用MRM模式，如果样品们的分子量与子离子不重叠，那么，即使在柱子中不被分开的化合物，也是可以认为在MS中被分开了。 文献报道的液质中几个峰，MRM检测到几十个物质就是多个物质在同一时间从色谱柱跑出来了。虽然出峰时间一样，但是每个化合物的peak应该是软件中可以显示出来的，只不过报道中由于篇幅有限，会被简略掉。 定性的话，需要标品，retention time 需要一致。 定量的话，需要先作标准曲线。peak area ration vs concentration. LC-MS 方法的设立说简单也简单，说难也难。 具体project具体分析。 |
2楼2012-08-10 18:43:01
lzjessie_wlf
金虫 (小有名气)
- ACI: 16
- 应助: 85 (初中生)
- 金币: 1007.2
- 红花: 9
- 帖子: 290
- 在线: 108.7小时
- 虫号: 1607967
- 注册: 2012-02-09
3楼2012-08-10 18:48:41
4楼2012-08-13 11:45:01
