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傻子木虫 (正式写手)
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【求助】哪位用TRI zol法提过樱花的总RNA?
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| 用TRI zol法提过几次樱花和樱桃的总RNA都没提出来。哪位提过的,能不能提供一下方法? |
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傻子
木虫 (正式写手)
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7楼2007-05-24 00:52:42
2楼2007-05-22 17:13:21
傻子
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1. 匀浆处理:将组织在液氮中磨碎,100mg加入1ml TRIzol。 2.将样品在室温(15-30℃)放置5分钟。 3.4℃12000rpm离心10分钟,取上清。 4.加入0.3ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。 5.4℃12000rpm离心10分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中。 6.把水相转移到新管中,加入0.5ml异丙醇【多糖样品加入0.25ml异丙醇和0.25ml高盐溶液(0.8M柠檬酸钠和1.2M NaCl)】-20℃放置20分钟。 7.4℃15000rpm离心10分钟,移去上清。 8.用1ml 75℅乙醇洗涤RNA沉淀,使沉淀悬浮。4℃ 8000rpm离心5分钟,弃上清。 9.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟,加入40μl DEPC水,用枪头吸打几次,-70℃保存。 我是按这个步骤做的,其他的样品如烟草、番茄可以提的出来,但是樱花、樱桃、桃子都提不出来。 |

3楼2007-05-22 23:44:08

4楼2007-05-23 19:01:18














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