应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助】哪位用TRI zol法提过樱花的总RNA?
51/1返回列表
查看: 924  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

傻子

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】哪位用TRI zol法提过樱花的总RNA?

用TRI zol法提过几次樱花和樱桃的总RNA都没提出来。哪位提过的，能不能提供一下方法?
回复此楼

» 猜你喜欢
1984年中国制造,长173CM,净重64kg,采用人工智能，国家免检优质产品。
1楼 2007-05-22 13:25:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

johnsooh

荣誉版主 (正式写手)

此用户来自小木虫总部信号不好

照着Invitrogen的 trizol说明书，即可提出 Total RNA

如果你是平行作的烟草、番茄可以提的出来，而樱花、樱桃、桃子提不出来，那么可能要求更改针对特殊植物样本的提取方法了，可是，如果不是平行操作，平行电泳检测，则不能说明方法有问题，建议重新作
赞一下 回复此楼
___▂▂▃▄▅▆▇█无信号︻╋████�?
5楼2007-05-23 23:19:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

轻5飞扬

金虫 (正式写手)
把你的方法写下来吧,看看有什么可以改进的地方,一般来讲,TRIzol的方法还是可以的
赞一下 回复此楼
2楼2007-05-22 17:13:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

傻子

木虫 (正式写手)
1. 匀浆处理：将组织在液氮中磨碎，100mg加入1ml TRIzol。
2．将样品在室温（15-30℃）放置5分钟。
3．4℃12000rpm离心10分钟，取上清。
4．加入0.3ml氯仿，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
5．4℃12000rpm离心10分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中。
6．把水相转移到新管中，加入0.5ml异丙醇【多糖样品加入0.25ml异丙醇和0.25ml高盐溶液(0.8M柠檬酸钠和1.2M NaCl)】-20℃放置20分钟。
7．4℃15000rpm离心10分钟，移去上清。
8．用1ml 75℅乙醇洗涤RNA沉淀，使沉淀悬浮。4℃ 8000rpm离心5分钟，弃上清。
9．室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀，大约晾5-10分钟，加入40μl DEPC水，用枪头吸打几次，-70℃保存。

我是按这个步骤做的，其他的样品如烟草、番茄可以提的出来，但是樱花、樱桃、桃子都提不出来。
赞一下 回复此楼
1984年中国制造,长173CM,净重64kg,采用人工智能，国家免检优质产品。
3楼2007-05-22 23:44:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
我不是做植物的，问一下樱花、樱桃、桃子是不是富含多糖？
赞一下 回复此楼
我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
4楼2007-05-23 19:01:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭