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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 4%PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）250bp处条带出现扭曲，求助！
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coal@live.cn

新虫 (小有名气)

[求助] 4%PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）250bp处条带出现扭曲，求助！

如图，我用的是4%非变性聚丙烯酰胺凝胶，跑的是SRAP-PCR程序，两张图的marker都是DL2000，两张图里DL2000的100bp条带均已跑出，故扭曲/压缩处对应的分子量是250bp。
请问这种统一而有规律的条带扭曲是怎么形成的，如何避免？

SRAP01



SRAP02
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1楼 2012-08-06 19:34:44
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coal@live.cn

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wu_shiyong at 2012-08-07 10:02:45
跑时溴酚蓝成一条很浓的直线，没有分开。
电压低点，还有把你用的溴酚蓝换啦，重新配。

嗯，我用的是自配的loading buffer（0.25%溴酚兰，40%蔗糖），上样前每份样品添加1/2体积的loading buffer，跑电泳时溴酚兰的确是呈一条直线（有些粗而淡），但这不是很正常吗？

溴酚兰是这周刚配的，但是没过滤。
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9楼2012-08-08 19:35:24
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是胶有问题啊
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事实证明，除了你自己，不要指望任何一个人
2楼2012-08-06 20:43:06
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-07 15:41:10
coal@live.cn: 金币+20, ★★★★★最佳答案, 正解啊！ 2012-08-09 22:10:53
跑时溴酚蓝成一条很浓的直线，没有分开。
电压低点，还有把你用的溴酚蓝换啦，重新配。
赞一下(1人) 回复此楼
低调稳重务实内敛---------------残
3楼2012-08-07 10:02:45
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wq123good

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-08-07 15:41:19
有低电压慢慢跑，底部的溴酚蓝是你自己切下去的吧，要等它自己从胶中跑出来
胶的底部气泡是否排出干净，这个很重要
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过好每一天
4楼2012-08-07 11:25:58
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