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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大侠们来看看我这个图吧
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无踪无影

金虫 (小有名气)

[交流] 大侠们来看看我这个图吧 已有5人参与

大侠们看看我的这个重组质粒双酶切的图吧，做了好几次都这样的，下面都是拖尾，目的片段那边都是拖尾，600bp左右的，不知道什么原因，双酶切酶切了4h
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一切皆有可能
1楼 2012-08-05 10:37:07
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ppmmhaha

铜虫 (小有名气)
Marker大小没标！
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2楼2012-08-05 10:56:31
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无踪无影

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ppmmhaha at 2012-08-05 10:56:31
Marker大小没标！

marker 是从上到下 5000  3000  2000  1500 1000  750  500
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一切皆有可能
3楼2012-08-05 10:58:12
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ppmmhaha

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 无踪无影 at 2012-08-05 10:58:12
marker 是从上到下 5000  3000  2000  1500 1000  750  500...

你的重组质粒有问题，双酶切的杂带太多了。建议重新提质粒，重新酶切。这些拖尾不管它了。
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4楼2012-08-05 11:01:10
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无踪无影

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ppmmhaha at 2012-08-05 11:01:10
你的重组质粒有问题，双酶切的杂带太多了。建议重新提质粒，重新酶切。这些拖尾不管它了。...

但是我的这个质粒PCR是有的啊
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一切皆有可能
5楼2012-08-05 15:13:43
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sd3824289

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-08-07 15:37:08
建议楼主酶切时间不要过长，2-3个小时足矣！而且我建议你这个图再重新跑下！而且你要确定一下除了你的目的片段上有你要的酶切位点外其他的位置还有没有相同的酶切位点，本人认为这一点也很重要！
赞一下 回复此楼
坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
6楼2012-08-07 09:13:31
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无踪无影

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sd3824289 at 2012-08-07 09:13:31
建议楼主酶切时间不要过长，2-3个小时足矣！而且我建议你这个图再重新跑下！而且你要确定一下除了你的目的片段上有你要的酶切位点外其他的位置还有没有相同的酶切位点，本人认为这一点也很重要！

恩  我也怀疑时间长了降解了 ，谢谢啊
赞一下 回复此楼
一切皆有可能
7楼2012-08-07 09:34:47
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damaomao

禁虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
8楼2012-08-07 09:36:06
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王贤卓

金虫 (正式写手)
点样问题
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9楼2012-08-07 09:47:51
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无踪无影

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by damaomao at 2012-08-07 09:36:06
楼主应该重新提取质粒  感觉每个带都很浅  好像浓度不高   再查一下酶切位点

恩  我正在试着重新提质粒 估计质粒浓度太低了
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一切皆有可能
10楼2012-08-07 09:51:05
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