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kyoran

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于用平板涂布法计算细菌数的几个菜鸟问题

各位高手们早上好,又来到苦逼的化学生求助的时候了。

前天老不容易跑到隔壁院去借了高温灭菌锅和超净工作台用,总算把循环水接种了。经过24小时培养后出现一些问题,望各位解答。

1、由于接种的时候用平板涂布法,移取了0.50mL液体(由于没有移液枪)于固体培养基表面。现观察到固体培养基表面有液体,而且有一些液体干涸后的痕迹,能观察到有明显的菌落,同时也有一些类似斑点的东西(比菌落小并且不是圆形),请问这算是菌落吗?

2、计算杀菌后原液的细菌时做了3个浓度梯度,分别是10倍、100倍、1000倍,现观察到10倍和100倍的培养皿上没有细菌生长,而1000倍的培养皿上有少数几个菌落。请问这种现象是正常的呢还是被感染了呢?

谢谢各位高手~
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trizol11

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
移液枪头必须灭菌,涂板等到菌液干燥后在放进恒温箱培养,(没有移液枪也要把用来移液的东西灭菌)。总之一句话尽量保证无菌操作。另外,放板的时候底朝上放置
任重道远……
10楼2012-07-29 12:12:25
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tupac225

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-07-26 15:28:19
kyoran: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-07-29 15:56:59
第一个问题,菌落应该是的,菌落小长长就会好的。但是,你是用什么涂板的,要注意无菌呀,不然实验没有保证。第二个问题,灭菌后的水,理论上应该是浓度低的菌落少,你的问题可能是1000被的污染了。
coasttocoast。
2楼2012-07-26 14:30:49
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gy313wyn

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kyoran: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-29 15:57:14
做细菌实验尤其注意防止污染。像你第一块板子肯定是污染了,正常来讲只会有一种颜色大小一样的菌落。
由于这种计数方法误差比较大,重复性也不好,这就要求实验要严谨,可能是涂板的时候1000污染了,但既然10和100都没有,可能是溶液里没有菌哇~
3楼2012-07-26 20:20:30
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kyoran

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tupac225 at 2012-07-26 14:30:49
第一个问题,菌落应该是的,菌落小长长就会好的。但是,你是用什么涂板的,要注意无菌呀,不然实验没有保证。第二个问题,灭菌后的水,理论上应该是浓度低的菌落少,你的问题可能是1000被的污染了。

关于1000的被污染,情况是这样的:我和我同学都做了类似的实验,她有一个1000的被污染了,我也有一个。这是一个污染的问题呢还是有一种什么说法能解释的呢? 求助~
4楼2012-07-26 21:40:42
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