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电泳图怎么全是引物二聚体?求解
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wjj1139
新虫
(初入文坛)
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虫号: 1494510
注册: 2011-11-16
专业: 植物病理学
[
求助
]
电泳图怎么全是引物二聚体?求解
求大家给我分析一下,为什么电泳图上全是引物二聚体,而我们的目的条带没有出来,退火温度已经很低了。。
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7.24.tif
2012-07-24 16:50:15, 2.74 M
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RNA提取及电泳问题(附图),虫友们能否帮我分析下啊~~
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1楼
2012-07-24 16:53:15
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myitcat
新虫
(初入文坛)
应助: 1
(幼儿园)
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在线: 4小时
虫号: 1690340
注册: 2012-03-14
专业: 微生物药物
【答案】应助回帖
引物和模板没结合,做个温度梯度试一下
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5楼
2012-08-10 09:42:17
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小小树虫
银虫
(小有名气)
应助: 1
(幼儿园)
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帖子: 168
在线: 36.2小时
虫号: 1926735
注册: 2012-08-06
性别: GG
专业: 植物病理学
跟我P的结果好像额 同求
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2楼
2012-08-06 17:27:47
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chenguestc
木虫
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虫号: 1337860
注册: 2011-07-05
性别: GG
专业: 作物分子育种
【答案】应助回帖
请加上阴阳对照确定PCR体系中所有component是没有问题的。如果确定没有问题,那就是你设计的引物又问题。
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3楼
2012-08-06 18:35:13
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王礼鹏
金虫
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虫号: 1197888
注册: 2011-01-30
性别: GG
专业: 心肌细胞/血管细胞损伤、修
【答案】应助回帖
★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流
2012-08-13 15:08:44
同意楼主的看法,可能是引物设计出现了问题,设计的正反引物就容易形成二聚体,建议用primer premier 5 设计引物,里面可以看到你设计的引物是否形成了二聚体。。。。祝好
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4楼
2012-08-10 09:39:40
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