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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电泳图怎么全是引物二聚体？求解
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wjj1139

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳图怎么全是引物二聚体？求解

求大家给我分析一下，为什么电泳图上全是引物二聚体，而我们的目的条带没有出来，退火温度已经很低了。。
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  • 附件 1 : 7.24.tif
    • 2012-07-24 16:50:15, 2.74 M

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1楼 2012-07-24 16:53:15
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jiaoxiayoulu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 2010013808 at 2012-08-10 14:31:47
复制的的别人的
1. 从引物自身着手，重新设计引物，这是最根本解决这一问题的办法；
2. 可能模板有问题；
3. 模板浓度过小，适当加大模板量；
4. Taq酶，引物，Mg2+浓度可能过高，可降低它们的浓度；
5. 取你所 ...

第五点有点看不懂，为什么这样引物二聚体会消失？
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13楼2013-05-10 16:32:45
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小小树虫

银虫 (小有名气)
跟我P的结果好像额 同求
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2楼2012-08-06 17:27:47
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

请加上阴阳对照确定PCR体系中所有component是没有问题的。如果确定没有问题，那就是你设计的引物又问题。
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3楼2012-08-06 18:35:13
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王礼鹏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-13 15:08:44
同意楼主的看法，可能是引物设计出现了问题，设计的正反引物就容易形成二聚体，建议用primer premier 5 设计引物，里面可以看到你设计的引物是否形成了二聚体。。。。祝好
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4楼2012-08-10 09:39:40
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