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western 中，目的蛋白没有，但是Marker 暴出来了，什么原因啊
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各位虫友： 我最近在做Western 实验，奇怪的是，目的蛋白没出来，Marker 和一些很大分子量的杂蛋白暴出来了，到底是什么原因啊？ 1. 我把ECL 染液滴到二抗上，它会发光，而且有杂蛋白暴出来，说明染液和二抗也没问题吧？ 2.我在转膜后，用立春红对NC膜进行了染色，条带很清晰，对转膜后的凝胶用考马斯亮蓝进行染色，条带很弱， 说明我的转膜是成功的。 3.我用1：1000的比例稀释一抗，在 4度下孵育过夜，第二天在孵育二抗，进行后续实验。 4.在滴上显色液后，MARKER 位置上会显示很亮的荧光，可其余地方没有，就让我很奇怪。 自己初学，没什么经验，希望得到大家的指导，谢谢 |
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11楼2012-07-22 19:36:40
2楼2012-07-20 11:50:50
3楼2012-07-20 16:50:10
ankang0910
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4楼2012-07-20 20:02:07