10楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-07-25 08:42:28
我觉得单酶切的应该磷酸化处理下

12楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-07-25 14:23:30
不好说，我们CIAP处理后的载体自连率很低的

13楼: Originally posted by tzaixmc at 2012-07-25 19:47:52
你们用的什么公司的CIAP啊？我用的takara的...

11楼: Originally posted by tzaixmc at 2012-07-25 10:26:01
我是单酶切的啊，CIAP处理了，载体自连还是很多啊？是不是CIAP失效了啊？...

15楼: Originally posted by hraikeyan at 2012-11-14 09:49:21
请问你构建的革兰氏阳性菌的基因文库吗？我现在基因都提不出来，我采用的事异丙醇沉淀法，发现异丙醇沉淀后没有絮状沉淀。能把你们的提取方法给我吗？...

16楼: Originally posted by tzaixmc at 2012-11-14 11:40:26
不是，是阴性的...

17楼: Originally posted by hraikeyan at 2012-11-14 12:10:10
那你们是用试剂盒提的？还是自配溶液提的？...

5楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2012-07-20 15:47:03
载体和目的片段的浓度没准确测过，也就简单跑了下核酸电泳。一般来说，目的片段与载体的摩尔比例在10:1比较合适。你的意思是，目的片段比载体多，连接不完全吧？，假设这样说，10ng DNA就完全包含你的所有DNA多样性 ...