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【求助】紫外分光光度计测定,这样的情况如何确定最佳吸收波长呢?谢谢
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lijun31823
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[
求助
]
【求助】紫外分光光度计测定,这样的情况如何确定最佳吸收波长呢?谢谢
昨天重新测了,没有自动扫描的,手动测。没有最大吸收波长,只有最低的,而且数据波动很大。
波长 A
200 0.917
205 0.908
210 0.717
215 0.511
220 0.345
225 0.217
230 0.13
235 0.078
240 0.048
245 0.033
250 0.028
255 0.028
260 0.035
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1楼
2012-07-19 08:16:54
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这个趋势和你操作没关系,是你的样品本身性质决定的。吸收在0.2~0.8确实比较好,就是这一段的斜率有点大,仪器影响估计会比较大。要不你选定这之间的一个波长,做一下加样回收率和中间精密度,看看结果如何,如果没问题的话,就可以用。
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6楼
2012-07-19 11:44:06
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【答案】应助回帖
★
感谢参与,应助指数 +1
lijun31823: 金币+1,
★★★
很有帮助
2012-07-19 09:34:13
选择检测波长一般选择吸收曲线上斜率小的地方,如峰顶或峰谷,这样略微的仪器偏差不会造成太大的影响;
另外因为检测的吸收度要适中,如果样品溶液浓度很大又不想要稀释,可以选择吸收小一点的波长处(或者用薄一点的比色皿);同理,如果浓度本身就很小就不能选择吸收很弱的波长。
在检测波长避免有别的物质的干扰,特别是紫外检测,即溶剂或是溶液中的其它成分在此波长下无吸收或是吸收较弱。
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2楼
2012-07-19 09:18:30
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
soundhorizo: 金币+3, 专家辛苦 ^^
2012-07-19 10:56:09
像你给出的这组数据,200nm处及245之后都较为平坦,但前者估计其它物质干扰很大,后面的吸收又太弱。有点麻烦
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2012-07-19 09:28:13
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2楼
:
Originally posted by
wddmq
at 2012-07-19 09:18:30
选择检测波长一般选择吸收曲线上斜率小的地方,如峰顶或峰谷,这样略微的仪器偏差不会造成太大的影响;
另外因为检测的吸收度要适中,如果样品溶液浓度很大又不想要稀释,可以选择吸收小一点的波长处(或者用薄一点 ...
吸光度不是说控制在0.2~0.8比较好吗,我测的数值怎么都那么小呢,溶液浓度需要怎么控制才好,我做的是I+G测定,参比是0.01mol/L HCL溶液。
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4楼
2012-07-19 09:29:51
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