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lijun31823

木虫 (小有名气)

[求助] 【求助】紫外分光光度计测定,这样的情况如何确定最佳吸收波长呢?谢谢

昨天重新测了,没有自动扫描的,手动测。没有最大吸收波长,只有最低的,而且数据波动很大。
波长        A
200        0.917
205        0.908
210        0.717
215        0.511
220        0.345
225        0.217
230        0.13
235        0.078
240        0.048
245        0.033
250        0.028
255        0.028
260        0.035
270        0.028
280        0.03
290        0.022
300        0.025
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lijun31823

木虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by wddmq at 2012-07-19 16:45:31
那你测出的数据也表明了240nm之后吸光度比较平稳了,这一段波长是可以用(就像文献里面说的250、260、280),不过吸收值比较小,你的样品的浓度可能要大一些,保证溶液吸光值在0.2~0.8的范围内,才会比较准。
没有 ...

确实是找不来标准品,文献中虽然都这么说,但是国家标准物质那里我都咨询了,没有的。现在不知道怎么办了
能按照这样的做下去吗?
13楼2012-07-19 17:06:29
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
lijun31823: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-07-19 09:34:13
选择检测波长一般选择吸收曲线上斜率小的地方,如峰顶或峰谷,这样略微的仪器偏差不会造成太大的影响;
另外因为检测的吸收度要适中,如果样品溶液浓度很大又不想要稀释,可以选择吸收小一点的波长处(或者用薄一点的比色皿);同理,如果浓度本身就很小就不能选择吸收很弱的波长。
在检测波长避免有别的物质的干扰,特别是紫外检测,即溶剂或是溶液中的其它成分在此波长下无吸收或是吸收较弱。
1234
2楼2012-07-19 09:18:30
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wddmq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
soundhorizo: 金币+3, 专家辛苦 ^^ 2012-07-19 10:56:09
像你给出的这组数据,200nm处及245之后都较为平坦,但前者估计其它物质干扰很大,后面的吸收又太弱。有点麻烦
1234
3楼2012-07-19 09:28:13
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lijun31823

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wddmq at 2012-07-19 09:18:30
选择检测波长一般选择吸收曲线上斜率小的地方,如峰顶或峰谷,这样略微的仪器偏差不会造成太大的影响;
另外因为检测的吸收度要适中,如果样品溶液浓度很大又不想要稀释,可以选择吸收小一点的波长处(或者用薄一点 ...

吸光度不是说控制在0.2~0.8比较好吗,我测的数值怎么都那么小呢,溶液浓度需要怎么控制才好,我做的是I+G测定,参比是0.01mol/L HCL溶液。
4楼2012-07-19 09:29:51
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