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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 今天提了一天的RNA，结果在紫外下只看到一团黑色。求分析！
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soffy0214

铜虫 (小有名气)

[求助] 今天提了一天的RNA，结果在紫外下只看到一团黑色。求分析！

我很确定我的rna是提出来了的。我用甲醛变性胶，加2微升EB，胶是红色的。然后加10微升样电泳，样中加4微升甲醛，2微升上样缓冲液，2微升10倍的MOPS缓冲液。检测时什么都看不见，只在溴酚蓝的位置看到一团黑色的东西。A260和A280都是负值。我的RNA哪去了？求解！

[ Last edited by soffy0214 on 2012-7-19 at 08:24 ]
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上帝关上一扇门，就会打开一扇窗。
1楼 2012-07-18 23:04:14
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-20 13:40:02
不一定，如果提出的RNA量不大而降解厉害的话有可能带跑不出来，这个是正常的，今天我还测试了一下，提完RNA后测浓度，用NANODROP，如果点上样，马上点测浓度，浓度是250ng/ul, 如果延迟10秒后再扣上测量杆再测，浓度就是220ng/ul。
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11楼2012-07-19 20:07:23
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你怎么确定你的RNA一定提出来了呢？然后就是你的跑胶条件是多少？
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2楼2012-07-19 08:38:47
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soffy0214

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-19 08:38:47
你怎么确定你的RNA一定提出来了呢？然后就是你的跑胶条件是多少？

因为有一团白色沉淀啊。加50微升的DEPC水后就溶解了。我使用trizol提的。60V，30min
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上帝关上一扇门，就会打开一扇窗。
3楼2012-07-19 09:42:57
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soffy0214

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jl860822 at 2012-07-19 08:38:47
你怎么确定你的RNA一定提出来了呢？然后就是你的跑胶条件是多少？

即使是降解了，也不该没有任何痕迹啊。
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上帝关上一扇门，就会打开一扇窗。
4楼2012-07-19 09:44:57
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